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文檔簡介
1、目的:研究泛素特異肽酶22(USP22)在膀胱移行細(xì)胞癌組織及細(xì)胞中的基因及蛋白表達(dá),并分析在膀胱癌組織和細(xì)胞中表達(dá)的差異情況,結(jié)合臨床資料,探討其可能的因果關(guān)系,進(jìn)而得出相關(guān)性意義。
方法:分析收集自2008年12月至2009年7月華中科技大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院泌尿外科膀胱癌手術(shù)切除的腫瘤標(biāo)本43例,其惡性度及病理分期都經(jīng)過病理報(bào)告證實(shí)無誤,正常膀胱組織31例,取材于癌旁遠(yuǎn)端的正常粘膜組織,其中男性患者30人,女性患者13人,
2、年齡約在41-77 歲之間,平均57.6 歲,取材均是肉眼明顯可分辨的癌組織,并遠(yuǎn)離腫瘤的切緣,防止因電刀高溫引起的周圍組織變性,患者在接受手術(shù)前均未接受放療或者化療。通過免疫組織化學(xué)法檢測病例標(biāo)本的usp22 蛋白表達(dá);及該院中心實(shí)驗(yàn)室保存低分化的EJ 膀胱癌細(xì)胞,用Trizol 抽提其RNA,蛋白裂解液獲得蛋白,并和膀胱癌組織一起做檢測,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄及實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測不同類型標(biāo)本和細(xì)胞中usp22的表達(dá);觀察不同類別標(biāo)本的數(shù)據(jù)差
3、異并與臨床資料相結(jié)合,進(jìn)行相關(guān)性分析;設(shè)計(jì)特異性siRNA 通過轉(zhuǎn)染沉默EJ細(xì)胞usp22基因,觀察對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞生長傳代增值情況后做出分析。
結(jié)果:泛素特異肽酶22 mRNA在人正常膀胱組織中表達(dá)量很低,在膀胱移行細(xì)胞癌中表達(dá)明顯升高,具有顯著的差異性,在低度惡性的組織中其表達(dá)要低于中高度惡性組織中的表達(dá)。免疫組織化學(xué)顯示膀胱移行細(xì)胞癌組織泛素特異肽酶22 陽性率為87.5%(36/43),高于正常膀胱黏膜組織35
4、.4%(11/31),且隨著惡性度的增加,陽性率升高。在但是與性別年齡等因素?zé)o關(guān);活的膀胱癌細(xì)胞株中有同樣類似的表達(dá),惡性度較高的EJ細(xì)胞中mRNA表達(dá)也和3 期膀胱癌細(xì)胞相似。
結(jié)論:泛素特異肽酶22 作為一種潛在的腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物,可能上調(diào)了膀胱組織中某些基因的表達(dá),進(jìn)而引起正常細(xì)胞的惡變,在膀胱癌的發(fā)生和發(fā)展過程中有可能起著重要的作用;它在膀胱組織中的表達(dá)同惡性度或分級(jí)成正相關(guān),有望成為判斷病情發(fā)展的有用指標(biāo),同時(shí)很
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