脊髓損傷模型中運(yùn)用EPO干預(yù)后腦內(nèi)興奮性氨基酸與脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡的比較研究.pdf

1、本課題分為三部分：第一部分研究脊髓在經(jīng)受機(jī)械性損傷后大腦中樞興奮性氨基酸含量在時(shí)間上的動態(tài)變化；第二部分是在明確了脊髓在經(jīng)受機(jī)械性損傷后大腦內(nèi)興奮性氨基酸含量的動態(tài)變化特點(diǎn)的基礎(chǔ)上，應(yīng)用具有優(yōu)良的神經(jīng)保護(hù)作用的促紅細(xì)胞生成素(EPO)進(jìn)行干預(yù)，觀察EPO對大腦內(nèi)興奮性氨基酸含量的影響；第三部分是在脊髓損傷模型中觀察EPO干預(yù)后的原位脊髓傷處脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況。 經(jīng)過三部分研究后，初步認(rèn)為運(yùn)用EPO干預(yù)后，脊髓損傷區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡

2、明顯減少，且與腦內(nèi)興奮性氨基酸變化呈平行關(guān)系，從而初步表明腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)變化與脊髓原發(fā)性損傷后的脊髓繼發(fā)性損傷有一定關(guān)系。 第一部分：腦微透析法研究大鼠脊髓損傷后腦內(nèi)興奮性氨基酸動態(tài)變化 目的：研究大鼠脊髓損傷后腦內(nèi)興奮性氨基酸水平變化。 方法：采用改良的Allen打擊法致傷大鼠TII段脊髓，運(yùn)用微透析技術(shù)檢測大鼠脊髓損傷前1h，損傷后0．5h，2h,6h，24h,72h其腦細(xì)胞外液(ECF)興奮性氨基酸含量的變化

3、，選取谷氨酸含量(【Gl川d)和天門冬氨酸含量([Asp]d)為興奮性氨基酸主要參考值。 結(jié)果：大鼠脊髓損傷0．5h后腦內(nèi)【Glu]a和[Asp】d最高，然后逐步回落，于傷后24小時(shí)大致恢復(fù)正常。 結(jié)論：脊髓損傷后腦內(nèi)興奮性氨基酸水平的一過性升高提示在脊髓損傷后大腦部分腦區(qū)神經(jīng)遞質(zhì)水平受到顯著影響。 第二部分：促紅細(xì)胞生成素(印0)對脊髓損傷后腦內(nèi)興奮性氨基酸的影晌 目的：探討促紅細(xì)胞生成素對脊髓損傷后腦

4、內(nèi)興奮性氨基酸的影響。 方法：采用改良的Allen打擊法致傷大鼠TlI段脊髓，治療組在傷后立即經(jīng)腹腔注射EP02000U／kg，損傷組則不予處理。利用微透析技術(shù)檢測損傷后0．Sh，2h，6h，24h，72h其腦細(xì)胞外液(ECF)興奮性氨基酸含量的變化，同樣選取谷氨酸含量([Olu]d)和天門冬氨酸含量(【Asmd)為興奮性氨基酸主要參考值。 結(jié)果：治療組腦內(nèi)興奮性氨基酸含量在傷后各個(gè)時(shí)相點(diǎn)均較損傷組明顯降低。結(jié)論：脊髓損

5、傷后早期經(jīng)腹腔注射促紅細(xì)胞生成素能有效降低腦內(nèi)興奮性氨基酸含量。 第三部分：促紅細(xì)胞生成素(印0)對脊髓損傷后原位脊髓傷處 脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響 目的：探討EPO在脊髓損傷模型中對脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。 方法：采用改良的Allen打擊法致傷大鼠TII段脊髓，治療組在傷后立即經(jīng)腹腔注射促紅細(xì)胞生成素2000U／kg，損傷組則不予處理，傷后三天取損傷處脊髓，運(yùn)用TUNEL法進(jìn)行凋亡檢測。 結(jié)果：E