Exendin-4的生物合成及其生物活性.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、Exendin-4是從希拉毒蜥唾液中分離的一種多肽激素，由39個氨基酸殘基組成，與胰高血糖素樣肽1（GLP-1）有53％的同源性，是GLP-1受體激動劑，與GLP-1類似，Exendin-4可調(diào)節(jié)血糖濃度，但GLP-1的半衰期僅有2min，而Exendin-4半衰期卻長達(dá)9.57h，因此在治療2型糖尿病方面具有廣闊的前景。 根據(jù)GeneBank中登錄的Exendin-4的基因序列，結(jié)合大腸桿菌的密碼子偏嗜性，對原有基因70％的密

2、碼子進(jìn)行改造，使其在大腸桿菌中高效表達(dá)；添加合適的限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)和腸激酶識別位點(diǎn)，構(gòu)建兩個重組表達(dá)載體pRSETB-Exendin-4和pET-32a（+）-Exendin-4，分別轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株大腸桿菌BL21系列菌株，只有表達(dá)載體pET-32a（+）-Exendin-4成功表達(dá)目的蛋白。在30℃條件下1mmol/L的IPTG誘導(dǎo)表達(dá)6h，融合蛋白表達(dá)量占細(xì)菌蛋白總量的32％。利用親和層析純化融合蛋白，每克濕菌體可獲得融合蛋白6.44

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