紫外線聯(lián)合臭氧及高溫誘導(dǎo)人外周血淋巴細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、[目的]
　　 有學(xué)者研究應(yīng)用紫外線聯(lián)合臭氧及高溫誘導(dǎo)人外周血細(xì)胞凋亡，再將全血重新回注入患者體內(nèi)，通過凋亡的血細(xì)胞(主要是淋巴細(xì)胞)誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫耐受和抗炎反應(yīng)，從而改善一些免疫炎癥性疾病患者的預(yù)后。本研究通過觀察紫外線、臭氧和高溫對人外周血淋巴細(xì)胞的誘導(dǎo)作用，從而建立穩(wěn)定的血細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)系統(tǒng)，以供基礎(chǔ)及臨床研究。
　　 [方法]
　　 取健康成人外周靜脈血，分別及聯(lián)合應(yīng)用紫外線、高溫和臭氧進(jìn)行誘導(dǎo)，采用淋巴

2、細(xì)胞分離液密度梯度離心分離外周血淋巴細(xì)胞。通過瑞氏-姬姆薩染色涂片鏡檢、瓊脂糖DNA凝膠電泳及流式細(xì)胞術(shù)定量測定，從細(xì)胞形態(tài)學(xué)、分子生物學(xué)以及細(xì)胞學(xué)水平觀察細(xì)胞凋亡情況。
　　 [結(jié)果]
　　 紫外線照射、高溫、臭氧誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞在瑞氏-姬姆薩染色后光鏡下觀察均可發(fā)現(xiàn)凋亡形態(tài)學(xué)改變，DNA電泳呈現(xiàn)有一定間隔的梯狀條帶：流式細(xì)胞術(shù)定量測定經(jīng)單獨(dú)紫外燈(15W，照射距離5cm)照射10 min，20 min，30 min，凋

3、亡率分別為12.03％，16.98％，26.58％；單獨(dú)經(jīng)臭氧濃度分別為14.5、29、43.5μg/mL處理20 min，凋亡率分別為6.76％，26.38％，35.1％；單獨(dú)經(jīng)溫度分別為40、42.5、45℃處理20 min，凋亡率分別為15.93％，26.83％，39.88％；經(jīng)溫度分別為40、42.5、45℃水浴聯(lián)合紫外照射20 min，凋亡率分別為26.3％，36.3％，54.45％；經(jīng)臭氧濃度分別為14.5、29、43.5μ

4、g/mL聯(lián)合42.5℃水浴及紫外照射20 min共同誘導(dǎo)，其凋亡率分別達(dá)49.6％，76.15％，67.83％；淋巴細(xì)胞在高溫、紫外線照射及臭氧的共同影響下，其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡反應(yīng)較單一或兩因素聯(lián)合誘導(dǎo)顯著提高(P＜0.05)，凋亡率在一定范圍內(nèi)可呈現(xiàn)時間和劑量效應(yīng)關(guān)系。42.5℃水浴、臭氧濃度29μg/mL聯(lián)合紫外照射20min后所致淋巴細(xì)胞凋亡率最高。
　　 [結(jié)論]
　　 單獨(dú)應(yīng)用紫外線、溫度及臭氧可誘導(dǎo)人外周血淋巴細(xì)