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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察青蒿琥酯對(duì)體外培養(yǎng)的人胚肺成纖維細(xì)胞(HFL-I)增殖及凋亡影響及機(jī)制,觀察青蒿琥酯對(duì)體外培養(yǎng)的人胚肺成纖維細(xì)胞膠原合成影響及機(jī)制。
方法:用0、1、10、100mg/L濃度的青蒿琥酯作用于體外培養(yǎng)的人胚肺成纖維細(xì)胞,定時(shí)用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,用Hochst33258染色從形態(tài)學(xué)上觀察細(xì)胞凋亡,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期及凋亡率;取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人胚肺成纖維細(xì)胞(HELF)系HFL-I細(xì)胞株,隨機(jī)分為觀察1~3組及
2、對(duì)照組,前三組分別加入濃度為1、10、100mg/L的青蒿琥酯,對(duì)照組加入等體積培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)24h后,收集細(xì)胞提取總RNA,RT-PCR法測(cè)定Bcl-2mRNA、BaxmRNA和SurvivinmRNA的表達(dá);用0、1、10、100mg·/L濃度的青蒿琥酯作用于體外培養(yǎng)的人胚肺成纖維細(xì)胞,用天狼猩紅染色法檢測(cè)膠原蛋白的合成,用RT-PCR法測(cè)定細(xì)胞I型和III型前膠原蛋白mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:青蒿琥酯呈劑量和時(shí)間依賴性抑
3、制HFL-I細(xì)胞的增殖(P<0.05),流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,HFL-I細(xì)胞G0/G1期細(xì)胞百分比逐漸上升,S期細(xì)胞百分比逐漸下降,說(shuō)明細(xì)胞阻滯于G0/G1期,G2/M期百分比上升,細(xì)胞凋亡率增加;Bcl-2mRNA及SurvivinmRNA的表達(dá)顯著低于對(duì)照組,BaxmRNA的表達(dá)顯著高于對(duì)照組;青蒿琥酯呈劑量依賴性降低膠原的生成(P<0.05),I型和III型前膠原蛋白mRNA的表達(dá)顯著低于對(duì)照組。
結(jié)論:青蒿琥酯可抑制
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