AQP5表達(dá)量在滲透壓對卵巢癌順鉑敏感性的影響中發(fā)揮重要作用.pdf

1、研究目的:探索滲透壓對卵巢癌細(xì)胞水通道蛋白表達(dá)的影響及滲透壓是否可以調(diào)節(jié)卵巢癌細(xì)胞的順鉑敏感性，并探討卵巢癌順鉑化療敏感性是否有與細(xì)胞的水通道蛋白表達(dá)有關(guān)。
　　方法:用不同濃度的山梨糖醇溶液建立細(xì)胞外高滲透壓環(huán)境，利用MTT實驗分析高滲環(huán)境對卵巢癌細(xì)胞系3AO細(xì)胞增殖以及對卵巢癌細(xì)胞順鉑敏感性的影響，采用定量PCR實驗及westren blot實驗檢測高滲透壓及順鉑或二者聯(lián)合對卵巢癌細(xì)胞水通道蛋白表達(dá)的影響，利用慢病毒介導(dǎo)的小干

2、擾RNA使細(xì)胞AQP5表達(dá)下調(diào)，并用MTT實驗檢測AQP5下調(diào)后卵巢癌細(xì)胞對高滲透壓環(huán)境的耐受性。
　　結(jié)果:1、高滲環(huán)境對卵巢癌細(xì)胞增殖的抑制作用隨著作用時間和濃度的增加而增加。2、細(xì)胞外高滲的環(huán)境可以誘導(dǎo)AQP5的表達(dá)，主要在高滲透壓環(huán)境處理細(xì)胞48h后效果明顯，該作用具有時間效應(yīng)和濃度效應(yīng)。3、利用siRNA下調(diào)AQP5表達(dá)后，卵巢癌細(xì)胞對高滲透壓環(huán)境的耐受性下降。4、不同濃度的順鉑對AQP5表達(dá)的影響呈現(xiàn)出先增高后降低的趨

3、勢，峰值出現(xiàn)在2.5μg/ml濃度的順鉑處。5、MTT結(jié)果表明，在3AO細(xì)胞中，對于小劑量的順鉑(小于2.5μg/ml c-DDP)來說，細(xì)胞外高滲可以促進(jìn)順鉑的毒性作用;但是，順鉑濃度較高時（超過5μg/mlc-DDP)，高滲環(huán)境反而減弱細(xì)胞的毒性作用。高滲透壓對卵巢癌細(xì)胞AQP5表達(dá)以及順鉑敏感性均有影響，且高滲對順鉑敏感性的影響方式與順鉑影響AQP5表達(dá)的方式呈現(xiàn)出相似性。
　　結(jié)論:我們的研究表明，在卵巢癌中，細(xì)胞外高滲環(huán)