蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠PPAR-γ、caludin-1及MUC2表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)三硝基苯磺酸/乙醇誘導(dǎo)建立潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)大鼠模型，觀察蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)UC大鼠一般情況及疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評(píng)分、過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferators-activated receptor-γ， PPAR-γ)、閉合蛋白(claudin-1)、結(jié)腸黏蛋白(mucoprotein，MUC2)表達(dá)的影響，以探究蘭茵風(fēng)揚(yáng)化濁解毒方治療UC

2、的作用機(jī)制，為臨床尋求新的治療方法和藥物。
　　方法:根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法，將60只Wistar雄性大鼠分成6組，分別為空白組(NG組)、模型組（MG組）、柳氮磺吡啶組（SASP組）、蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方高劑量組（HDG組）、蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方中劑量組(MDG組)、蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方低劑量組(LDG組)，每組各10只。除NG組外，其余各組用TNBS/乙醇法誘導(dǎo)建立UC大鼠模型。造模成功3d后，NG組正常喂養(yǎng)，模型組給予生理鹽水灌胃，對(duì)照

3、組予柳氮磺吡啶混懸0.30g/(kg.d)灌胃，其他各治療組給予中藥相應(yīng)劑量灌胃，每日一次，共14d。觀察并記錄大鼠大便性狀、體重等一般情況，測(cè)算各組DAI評(píng)分，觀察結(jié)腸黏膜大體觀及病理學(xué)的改變。用PT-PCR法檢測(cè)PPAR-γ、claudin-1及MUC2的表達(dá)并分析蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)各組大鼠黏膜組織中PPAR-γ、 claudin-1及MUC2表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:
　　1、一般情況與DAI評(píng)分
　　同NG組比

4、較，造模后各組大鼠均出現(xiàn)精神不振，進(jìn)食量減少，活動(dòng)量及靈活度下降，體重減輕，被毛散亂欠光澤，稀便或黏液血便。藥物治療14d后，HDG組一般情況接近NG組，MDG組、SASP組均不及HDG組改善明顯，兩者一般情況無(wú)明顯區(qū)別，LDG組改善情不及MDG組及SASP組，但好于MG組。
　　DAI評(píng)分:MG(2.46±0.43)與HDG(0.37±0.35)、MDG(0.81±0.29)、 LDG（1.56±0.41）、SASP（0.78±

5、0.29）比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);HDG與MDG、LDG、SASP比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);LDG與MDG、SASP比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);MDG與SASP比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2、黏膜大體觀與病理學(xué)觀察
　　黏膜大體觀:MG組最差，MDG組與SPAP組無(wú)明顯差別，均差于HDG組且優(yōu)于LDG組，HDG組與NG組接近。
　　病理學(xué)觀察:MG組同NG組比

6、較，只見(jiàn)少量結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞，腺體缺失，黏膜層毛細(xì)血管充血，有明顯水腫，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，糜爛、潰瘍形成。MDG組、SASP組黏膜恢復(fù)優(yōu)于LDG組，不及HDG組。HDG組黏膜恢復(fù)后與NG組接近。
　　3、PPAR-γ、claudin-1及MUC2檢測(cè)結(jié)果
　　PPAR-γ:與NG組（0.23±0.04）比較，MG組PPAR-γ表達(dá)降低明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與MG組（0.19±0.02）比較，各治療組表達(dá)均明顯上

7、升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); HDG組（0.33±0.02）與MDG組（0.29±0.04）、LDG（0.25±0.02）、SASP組（0.30±0.03）比較，能明顯上調(diào)大鼠腸黏膜PPAR-γ的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);SASP組與MDG組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);SASP組與LDG組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　claudin-1:與NG組（0.22±0.03）比較，MG組

8、claudin-1表達(dá)降低明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與MG組（0.19±0.03）比較，各治療組表達(dá)均明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);HDG組（0.35±0.04）與MDG組（0.31±0.03）、LDG（0.27±0.03）、SASP組（0.32±0.04）比較，能明顯上調(diào)大鼠腸黏膜claudin-1的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;SASP組與MDG組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05); SAS

9、P組與LDG組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　MUC2:與NG組（0.23±0.02）比較，MG組MUC2表達(dá)降低明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與M組（0.19±0.02）比較，各治療組表達(dá)均明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); HDG組（0.41±0.03）與MDG組（0.33±0.03）、LDG（0.28±0.04）、SASP組（0.34±0.06）比較，能明顯上調(diào)大鼠腸黏膜MUC2的表達(dá)，差異

10、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);SASP組與MDG組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05); SASP組與LDG組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　1、蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方能夠改善UC大鼠腹瀉、黏液膿血便等癥狀，對(duì)緩解模型大鼠的病理?yè)p傷有效，其療效與中藥劑量呈一定的量-效關(guān)系。
　　2、蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方治療UC的作用機(jī)制，可能是通過(guò)上調(diào)PPAR-γ、 clandin-1、MUC2的基因表達(dá)，激活抑