戊烷硒啉對腫瘤細胞的影響及耐藥細胞Acc-m-DDP細胞的建立.pdf

1、戊烷硒啉(簡稱WB硒啉藥物)是我們實驗室新合成的乙烷硒啉系列藥物。乙烷硒啉(ethaselen，BBSKE，臨床Ⅱ期)是一種新型硫氧還蛋白還原酶抑制劑，前期研究發(fā)現(xiàn)BBSKE能夠靶向抑制硫氧還蛋白還原酶的活性，抑制多種腫瘤細胞生長，誘導腫瘤細胞凋亡，并且具有一定的免疫調節(jié)活性。戊烷硒啉作為乙烷硒啉的系列藥物之一，研究發(fā)現(xiàn)：戊烷硒啉對肺癌細胞A549，口腔咽喉癌細胞Acc-m，肝癌細胞HepG-2細胞具有顯著的生長抑制作用；其抑制腫瘤細胞

2、生長增殖，誘導凋亡的過程，可能是通過抑制硫氧還蛋白還原酶活性這一途徑來實現(xiàn)；此外，腫瘤細胞內(nèi)的活性氧自由基也發(fā)現(xiàn)起著一定的作用。本研究還對戊烷硒啉對非小細胞型肺癌A549，高轉移型涎腺腺樣囊癌Acc-m細胞，肝癌HepG-2細胞的影響的作用機制進行了一定的研究，得出了一些科學的結論。
　　 研究主要采用的方法，四甲基噻唑藍(MTT)比色法測定戊烷硒啉對多種人體腫瘤細胞生長增殖抑制作用；DTNB法測戊烷硒啉對體外和腫瘤細胞內(nèi)硫氧還

3、蛋白還原酶活性的影響；Western Blot測戊烷硒啉對HepG-2肝癌細胞內(nèi)硫氧還蛋白還原酶蛋白含量水平的影響；流式細胞儀測定戊烷硒啉對A549肺癌細胞和涎腺癌細胞Acc-m細胞周期阻滯的影響；DCFH-DA法測戊烷硒啉對A549細胞和Acc-m細胞內(nèi)活性氧自由基水平的影響。
　　 主要研究結論：戊烷硒啉對肺癌細胞A549，口腔咽喉癌細胞Acc-m，肝癌細胞HepG-2細胞具有一定的生長抑制作用；作用機制可能為：使腫瘤細胞停

4、滯在G1期，能觀察到細胞毒作用具有相應的時間梯度一致性和劑量梯度一致性；不同劑量的戊烷硒啉硒啉干預后，TrxR活性被不同程度地抑制；Western Blot半定量分析細胞內(nèi)硫氧還蛋白還原酶含量，發(fā)現(xiàn)酶含量無顯著性變化，我們推斷戊烷硒啉可能是通過抑制硫氧還蛋白還原酶的活性，而不是通過降低胞內(nèi)酶含量來降低細胞內(nèi)酶活性；一定量的戊烷硒啉作用腫瘤細胞后，細胞內(nèi)活性氧自由基水平都呈現(xiàn)顯著性的增高，并且這種變化與腫瘤細胞的生長抑制程度呈一致性。