CXCR4基因轉(zhuǎn)染豬MSCs提高細(xì)胞體外遷移能力的研究.pdf

1、目的：探討基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1（SDF-1）受體-CXCR4基因轉(zhuǎn)染豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）提高細(xì)胞體外遷移能力的可行性。
　　 方法：（1）按照Nancer方法培養(yǎng)MSCs，轉(zhuǎn)染帶熒光的CXCR4基因，流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染前與轉(zhuǎn)染后MSCs的細(xì)胞周期。（2）用5-氮胞苷（5=aza）誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染CXCR4基因的MSCs，并行結(jié)蛋白（desmin）、肌球蛋白重鏈（MHC）、心肌特異性肌鈣蛋白Ⅰ免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定。對(duì)照組為未轉(zhuǎn)染CX

2、CR4基因的MSCs。（3）通過(guò)Transwell趨化實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)經(jīng)過(guò)CXCR4轉(zhuǎn)染后的MSCs向SDF-1趨化能力的變化。
　　 結(jié)果：（1）體外培養(yǎng)的原代MSCs10-14天達(dá)到融合，CXCR4基因轉(zhuǎn)染后的MSCs能成功表達(dá)CXCR4，轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞周期無(wú)明顯改變。（2）與對(duì)照組相同，實(shí)驗(yàn)組經(jīng)5-aza刺激后，部分MSCs成梭形，結(jié)蛋白、肌球蛋白重鏈、心肌特異性肌鈣蛋白Ⅰ免疫細(xì)胞化學(xué)染色均為陽(yáng)性。（3）Transwell趨化實(shí)驗(yàn)