TRAIL、DR4、DR5在皮膚血管瘤中的表達(dá)及與細(xì)胞凋亡的相關(guān)性研究.pdf

1、背景和目的血管瘤是嬰幼兒時期常見的良性腫瘤，其自然病程較為特殊，大多數(shù)血管瘤有一明顯的早期快速增生期和緩慢的自行消退期，目前其發(fā)生發(fā)展和消退的演變機(jī)制尚不明確，治療效果也非十分理想。近年來血管瘤自行消退的機(jī)制備受關(guān)注，對其自行消退機(jī)制的揭示將有助于尋找一條新的更為安全有效的治療途徑。已有越來越多的研究表明細(xì)胞凋亡的存在與血管瘤的自行消退過程密切相關(guān)，部分凋亡相關(guān)因子在其中可能發(fā)揮了一定的調(diào)控作用。腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(tumor

2、necrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand，TRAIL)是新近發(fā)現(xiàn)的介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的信號分子，至今己發(fā)現(xiàn)5種受體，包括兩種死亡受體(deathreceptor,DR)即TRAIL-R1(DR4)、TRAIL-R2(DR5)，兩種誘騙受體(decoyreceptor,DcR)即TRAIL-R3(DcR1)、TRAIL-R4(DcR2)以及可溶性受體OPG(osteoprotegerin)。T

3、RAIL有兩種存在形式，即膜結(jié)合型和可溶性，與死亡受體結(jié)合后均可選擇性地誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞的凋亡，而對正常細(xì)胞無明顯殺傷作用。由于TRAIL已在多項動物實驗及體外實驗顯示出良好的抗腫瘤效應(yīng)且具有明顯的安全性，其在腫瘤治療中的作用愈來愈受到重視，應(yīng)用重組TRAIL進(jìn)行腫瘤治療已成為研究熱點之一。 至今TRAIL及其受體在多種腫瘤組織上的表達(dá)已見報道，其差異性表達(dá)與部分腫瘤的生物學(xué)行為和預(yù)后有關(guān)，但TRAIL在血管瘤中的研究尚不

4、多見，有關(guān)其死亡受體及血清可溶性TRAIL(solubleTRAIL，sTRAIL)在血管瘤中的研究未見報道，本實驗擬通過檢測血清sTRAIL、組織中TRAIL及DR4、DR5蛋白在皮膚血管瘤不同階段的表達(dá)，同時檢測瘤體組織中細(xì)胞凋亡情況，旨在初步探討凋亡相關(guān)因子TRAIL與細(xì)胞凋亡的關(guān)系及其在血管瘤自行消退過程中的可能作用。 材料與方法組織標(biāo)本：選用手術(shù)切除的皮膚血管瘤標(biāo)本42例，根據(jù)Mulliken等的血管瘤組織學(xué)分期標(biāo)準(zhǔn)并

5、結(jié)合疾病的臨床生物學(xué)行為將其分為增生期血管瘤和消退期血管瘤兩實驗組，另取20例正常皮膚標(biāo)本作為對照。①應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測TRAIL及DR4、DR5蛋白的表達(dá)。②應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometer,FCM)檢測TRAIL的相對含量。③分別應(yīng)用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記技術(shù)(terminal-deoxynucleotidy1transferasemediatednickendlabeling，TUNEL)和FC

6、M檢測細(xì)胞凋亡情況，并分析血管瘤組織中TRAIL蛋白含量與細(xì)胞凋亡的關(guān)系。 血清標(biāo)本：來源于與組織標(biāo)本相同的血管瘤病例，分組同組織標(biāo)本，分為增生期血管瘤和消退期血管瘤兩實驗組，另選用20例健康人血清作為對照。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)檢測血清sTRAIL水平。 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，顯著性水準(zhǔn)α=0.05。 結(jié)論:1

7、.細(xì)胞凋亡存在于血管瘤的各個階段，在由增生期轉(zhuǎn)變?yōu)橄似诘倪^程中出現(xiàn)了細(xì)胞凋亡的上調(diào)，提示細(xì)胞凋亡可能參與了血管瘤的自行消退過程。 2.TRAIL蛋白及其死亡受體DR4、DR5在不同階段血管瘤組織中存在差異性表達(dá)，在血管瘤消退期，促凋亡因子TRAIL及其死亡受體DR4、DR5的表達(dá)水平升高，提示TRAIL可能通過與DR4、DR5結(jié)合參與了血管瘤由增生期轉(zhuǎn)變?yōu)橄似诘倪^程。 3.TRAIL蛋白的表達(dá)水平與細(xì)胞凋亡水平呈正相