針灸對荷瘤小鼠化療后骨髓細胞DNA修復蛋白MGMT、POL-β的影響.pdf

1、目的:本課題采用S180荷瘤小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)造成骨髓抑制模型,觀察第2天、4天、6天CTX荷瘤小鼠外周血白細胞計數(shù)、骨髓細胞DNA修復蛋白MGMT、POL-β的表達量,通過對上述指標的分析,探討針灸減輕化療不良反應,保護骨髓造血細胞,改善骨髓抑制與骨髓細胞DNA修復之間的相關性,從而揭示針灸改善化療致骨髓抑制,提升外周血白細胞的分子生物學機制,也為探索針灸在腫瘤相關疾病中的應用提供實驗室依

2、據(jù)。
　　方法:選用清潔級,雄性,體重22±2g的昆明種(KM)小鼠96只,先用S180肉瘤細胞在小鼠的右腋下植瘤,5天后再根據(jù)體重把荷瘤小鼠隨機分為空白組、模型組、針刺組、艾灸組。針刺組、艾灸組、模型組小鼠一次性腹腔注射CTX150mg/kg,即按照小鼠體重0.02ml/g用藥量CTX溶液濃度為7.5mg/ml,停藥后4h即造出模型[1]。空白組小鼠按照0.02ml/g劑量腹腔注射0.9％生理鹽水,時間與造模各組時間同步。造模結

3、束后4小時針刺組、艾灸組按造模時間順序進行治療。選用“大椎”、“膈俞”、“腎俞”、“足三里”。模型組、空白組陪同抓取、固定。按治療時間的先后順序,在第2天、第4天、第6天治療后各隨機處死一批小鼠取材。分別用人工鏡檢檢測外周血白細胞計數(shù)、免疫組織化學的方法檢測骨髓細胞DNA修復蛋白MGMT、POL-β表達量。
　　結果:
　　1.針灸改善荷瘤小鼠化療后骨髓抑制,升高白細胞的療效確切。注射CTX的各組荷瘤小鼠從注射CTX后的第2

4、天白細胞就開始下降,第3天模型組、針刺組、艾灸組白細胞計數(shù)降至最低,第4天開始回升,第5天模型組、針刺組、艾灸組白細胞數(shù)均已超過基礎白細胞水平,且針刺組、艾灸組白細胞數(shù)高于模型組。第2天、第4天、第6天針刺組高于艾灸組,但無顯著性差異(P>0.05)。
　　2.針刺和艾灸可以提高荷瘤小鼠化療后骨髓組織細胞MGMT蛋白的表達。第2天,模型組、針刺組、艾灸組骨髓細胞MGMT蛋白表達均高于空白組,針刺組與艾灸組低于模型組;第4天,針刺組

5、、艾灸組均高于模型組,且針刺組有顯著性差異(P<0.05),第6天,針刺組、艾灸組均高于模型組,均無顯著差異。針刺組與艾灸組比較,第2天、第4天MGMT蛋白的表達針刺優(yōu)于艾灸,第6天艾灸優(yōu)于針刺,但均無顯著性差異(P>0.05)。
　　3.針刺和艾灸可以提高荷瘤小鼠化療后骨髓組織細胞POL-β蛋白的表達。第2天、第4天、第6天針刺組、艾灸組荷瘤小鼠化療后骨髓細胞POL-β蛋白表達高于模型組,第4天有顯著性差異(P<0.05);第2

6、天,針刺組高于艾灸組,第4天、第6天低于艾灸組,均無顯著性差異(P>0.05)。
　　結論:
　　1.針灸改善荷瘤小鼠化療后骨髓抑制,升高白細胞的療效是確切的,針刺和艾灸兩種方法比較沒有顯著差異。
　　2.針灸提高了荷瘤小鼠環(huán)磷酰胺化療后骨髓細胞DNA直接修復蛋白MGMT的表達,從而可以促進受損骨髓細胞DNA的直接修復,改善骨髓抑制。
　　3.針灸提高了荷瘤小鼠環(huán)磷酰胺化療后骨髓細胞DNA切除修復蛋白POL-β的