異硫氰酸苯已酯(PHI)誘導(dǎo)人T細(xì)胞白血病jurkat細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察異硫氰酸苯己酯(PHI)對(duì)人T細(xì)胞白血病jurkat細(xì)胞株生物學(xué)行為的作用，研究PHI對(duì)人T細(xì)胞白血病jurkat細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白、組蛋白乙?；?、甲基化、Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響，闡述其誘導(dǎo)凋亡可能的分子機(jī)制。
　　方法：采用MTT方法繪制PHI作用后jurkat細(xì)胞的增殖率變化；采用流式細(xì)胞術(shù)觀察PHI對(duì)jurkat細(xì)胞凋亡的影響；用蛋白免疫印跡法（Western Blot）觀察jurkat細(xì)胞凋亡

2、相關(guān)蛋白BcL-2、procaspase-3、procaspase-9、Cyt-C的變化及組蛋白乙?；疕3、H4，組蛋白甲基化H3K9、H3K4水平的變化；同時(shí)研究Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果：（1）PHI可使jurka t細(xì)胞的增殖率下降、凋亡率上升，IC50約為20μmol/L，并以劑量依賴性和時(shí)間依賴性方式下調(diào)jurka t細(xì)胞BcL-2、Procaspase-3、Procaspa

3、se-9、Cyt-C的表達(dá)；（2）PHI可增加jurka t細(xì)胞組蛋白乙?；疕3、H4及組蛋白甲基化H3K4水平，降低甲基化H3K9水平；（3）PHI處理7小時(shí)后jurkat細(xì)胞Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路β-catenin及其周期相關(guān)基因TCF、c-myc、cyclinD1表達(dá)均下降。
　　結(jié)論：（1）PHI可抑制jurkat細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡，可能是通過(guò)激活細(xì)胞內(nèi)源性凋亡通路發(fā)揮作用。（2）PHI可加強(qiáng)組蛋白H3