兩株乳酸桿菌體內(nèi)外降膽固醇的篩選及相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、目的:
　　 從正常人腸道糞便中分離的潛在目的菌中篩選出有降膽固醇能力的菌株,并進(jìn)行鑒定。
　　 方法:
　　 通過改良的膽固醇MRS培養(yǎng)基作為篩選模型進(jìn)行目的菌的篩選,并對降膽固醇能力較好的菌株進(jìn)行初步鑒定。
　　 結(jié)果:
　　 經(jīng)過初篩和復(fù)篩,篩選出4株降膽固醇能力在30％以上的菌株,降解率分別為M7-544.7％,M2-134.2％,M10-2-832.5％,MM1—16為32.4％；將M7

2、-5和M2-1進(jìn)行鑒定,M7-5為發(fā)酵乳酸桿菌,M2-1為植物乳酸桿菌。
　　 結(jié)論:
　　 菌株M7-5和M2-1在體外有較強(qiáng)的降膽固醇能力,經(jīng)鑒定分別為發(fā)酵乳桿菌及植物乳桿菌,有待于將其應(yīng)用于動物體內(nèi)進(jìn)行進(jìn)一步研究。
　　 目的:
　　 觀察2株乳酸桿菌對高脂飲食喂養(yǎng)的SD大鼠膽固醇代謝的影響,評價(jià)其對高脂飲食喂養(yǎng)的SD大鼠降膽固醇作用的有效性和安全性,從而為篩選到有利于人體降膽醇的功能菌提供依據(jù)。<

3、br>　　 方法:
　　 40只SD大鼠隨機(jī)分為4組,K組喂養(yǎng)普通飼料,E、F、I組喂養(yǎng)改良高脂飼料,同時(shí)以2株乳酸菌干預(yù),E組是M2-1,F組是M7-5。Ⅰ組不加益生菌,為高脂模型組,6周末處死大鼠,檢測大鼠血脂指標(biāo),血清總膽葉酸、肝脂質(zhì)、糞脂質(zhì),體重增加量,Lee指數(shù),肝組織病理學(xué)檢查及血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶等指標(biāo)。
　　 結(jié)果:
　　 1、高脂模型組血清TC、TG、LDL-C較正常對照組比均升高(P<0.05),

4、差異有顯著性,乳酸菌E組和F組比高脂模型組下降,以F組效果最好,差異有顯著性。
　　 2、第4周和第6周,高脂模型組血膽汁酸與正常對照組比升高,但無顯著性差異,益生菌E組較高脂模型組下隆,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3、糞膽汁酸和膽固醇高脂模型組升高,與正常對照組比,P<0.05,差異有顯著性；乳酸菌E組的膽汁酸和F組的膽固醇均升高,分別與高脂模型組及正常對照組比較,P<0.05,差異有顯著性。
　　 4、高脂模型

5、組Lee’s指數(shù)比正常對照組高,P<0.05,差異有顯著性；乳酸菌E組和F組均比高脂模型組低,比正常組高,尤其在第6周,F組與高脂模型組比差異有顯著性(P<0.05)。
　　 5、高脂模型組及乳酸菌E組和F組,每周體重增加量較正常對照組高,有顯著性差異；第6周乳酸菌F組體重增加量下降,比高脂模型組降低,差異有顯著性。
　　 6、肝病理檢查HE染色高脂模型組肝脂肪變性較明顯,與正常對照組比有顯著性差異而乳酸菌E組和F組不明

6、顯,與正常對照組無差異。
　　 7、高脂模型組血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高,但分別與其他各組比較無顯著性差異。
　　 結(jié)論:
　　 1、改良高脂飲食配方連續(xù)喂養(yǎng)SD大鼠6周,可以成功造出高脂固醇血癥模型。
　　 2、對兩株乳桿菌M7-5和M2-1對SD大鼠高脂血癥模型有降膽固醇作用,以M7-5效果更好。
　　 3兩株乳酸菌可能的降脂機(jī)制是減少了肝脂質(zhì)沉積和增加了糞脂的排泄,它們的機(jī)制可能不完全相同,前者以增

7、加糞膽固醇的排泄為主,而后者則以增加糞膽汁酸的排出為主。
　　 目的:
　　 探討兩株乳酸菌影響SD大鼠飲食性高脂血癥脂質(zhì)代謝的可能機(jī)制
　　 方法:
　　 實(shí)驗(yàn)動物、分組、建模和干預(yù)方法同第2章,第6周末處死大鼠,留取各組肝臟及回腸粘膜上皮標(biāo)本,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測肝臟孤核受體FXR及細(xì)胞表面受體ABCA1和ABCG5基因mRNA的表達(dá),檢測回腸粘膜上皮組織LXRα、ABCA1和ABCG5基因m

8、RNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1、高脂模型組,肝組織FXR受體及LXRα受體,回腸粘膜上皮組織LXRα、ABCA1及ABCG5受體與正常對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而肝組織ABCG5表達(dá)無明顯上調(diào)。
　　 2、乳酸菌E組(植物乳肝菌M2-1)肝組織FXR表達(dá)與高脂模型組相比顯著下調(diào),LXRα則顯著上調(diào),回腸粘腸上皮組織細(xì)胞表面受體ABCG5上調(diào)(P<0.05)。
　　 3、乳酸菌F組

9、(發(fā)酵乳桿菌M7-5)肝組織孤核受體FXR與高脂模型組比表達(dá)下調(diào),肝組織LXRα、ABCG5,回腸粘膜上皮組織LXRα、ABCA1、ABCG5與高脂膜型組相比均上調(diào),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1、發(fā)酵乳桿菌M7-5和植物乳桿菌M2-1可降低高脂飲食喂養(yǎng)的SD大鼠血清膽固醇。
　　 2、發(fā)酵乳桿菌M7-5和植物乳桿菌M2-1作用靶點(diǎn)可能涉及了肝組織和回腸粘膜的某些受體。前者抑制肝臟FXR的