耳針激活膽堿能抗炎通路抑制糖尿病血管并發(fā)癥炎癥反應(yīng)機(jī)制研究.pdf

1、目的:觀察耳甲區(qū)穴位刺激對2型糖尿病模型大鼠血清炎癥因子和胰島素抵抗指數(shù)的調(diào)節(jié)作用,探討耳針穴位刺激抑制糖尿病炎癥血管并發(fā)癥的膽堿能抗炎作用機(jī)制,揭示傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)耳療作用的科學(xué)內(nèi)涵,為臨床防治糖尿病及其并發(fā)癥提供新的干預(yù)方法和策略參考。
　　方法:
　　(1)從80只大鼠中隨機(jī)抽取10只作組1(正常組),以正常飼料喂養(yǎng);其余70只采用高脂高糖加鏈脲佐菌素誘導(dǎo)建立2型糖尿病大鼠模型;
　　(2)將造模成功的43只大鼠分為:

2、組2(模型組)、組3(耳針組)、組4(迷走神經(jīng)切斷組)、組5(阿托品組)、組6(六烴季銨組)、組7(α-銀環(huán)蛇毒素組);各組分別作如下處理:組2不作處理,僅作模型對照;組3電針刺激耳甲CO11穴位,每次30分,連續(xù)10天;組4-7予以組3相同的耳針刺激,但組4耳針刺激前離斷耳針刺激同側(cè)頸部迷走神經(jīng),組5、6、7耳針刺激前分別尾靜脈注射阿托品、六烴季銨、α-銀環(huán)蛇毒素;
　　(3)最后一次耳針刺激前禁食12h,針刺結(jié)束后立即麻醉大鼠

3、、腹主動脈取血、離心取血清,酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清炎癥因子TNF-α、IL-6、CRP和IL-10水平;
　　(4)血糖試紙測定各組大鼠空腹血糖(FPG),酶聯(lián)免疫吸附法檢測各組大鼠血清胰島素水平(FINS),計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)[HOMA-IR=(FINS×FPG)/22.5];并采用皮爾森積矩相關(guān)系數(shù)法分析模型組中炎癥因子濃度水平與HOMA-IR之間的線性相關(guān)關(guān)系;
　　(5)最后一次耳針刺激結(jié)束后,各組分別取2只大鼠灌注

4、固定大腦組織,開顱分離海馬,采用透射電鏡觀察海馬區(qū)腦微血管炎癥損傷情況。
　　結(jié)果:
　　(1)模型組大鼠胰島素抵抗指數(shù)和促炎因子TNF-α,IL-6,CRP水平均較正常組顯著升高,但抗炎因子IL-10水平顯著降低;促炎因子TNF-α,IL-6,CRP水平與HOMA-IR之間呈正相關(guān)關(guān)系,抗炎因子IL-10水平與HOMA-IR之間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系;
　　(2)耳針刺激CO11穴位后可顯著降低異常增加的TNF-α,IL-6,

5、CRP水平,升高明顯減低的IL-10水平,減低胰島素抵抗指數(shù);
　　(3)耳針刺激前離斷針刺側(cè)頸部迷走神經(jīng)或尾靜脈注射六烴季銨,α-銀環(huán)蛇毒素均可抵消耳針調(diào)節(jié)炎癥因子的效應(yīng),但耳針刺激前尾靜脈注射阿托品對耳針效應(yīng)無明顯影響;
　　(4)模型組大鼠海馬區(qū)毛細(xì)血管炎癥損傷明顯,基底膜較正常組顯著增厚,水腫;耳針組大鼠海馬區(qū)微血管基底膜水腫,增厚程度較模型組明顯減小;
　　(5)耳針刺激前離斷針刺側(cè)頸部迷走神經(jīng)或尾靜脈注射六

6、烴季銨,α-銀環(huán)蛇毒素均可抵消耳針保護(hù)海馬區(qū)微血管的效應(yīng),但耳針刺激前尾靜脈注射阿托品對耳針效應(yīng)無明顯影響。
　　結(jié)論:
　　(1)促炎因子的異常升高和抗炎因子的明顯降低伴隨2型糖尿病的發(fā)病過程,糖尿病可能是一種慢性炎癥性疾病;
　　(2)耳針刺激迷走神經(jīng)分布區(qū)穴位CO11可抑制2型糖尿病炎癥反應(yīng),減低糖尿病大鼠胰島素抵抗指數(shù),產(chǎn)生保護(hù)2型糖尿病大鼠腦微血管的效果;
　　(3)耳針效應(yīng)的發(fā)揮依賴完整的迷走神經(jīng),可