肥大細(xì)胞在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)理中作用的研究.pdf

1、背景:
　　子宮內(nèi)膜異位癥（以下簡(jiǎn)稱內(nèi)異癥）是指具有生長(zhǎng)功能的子宮內(nèi)膜組織（腺體和間質(zhì)）出現(xiàn)在子官腔被覆蓋內(nèi)膜及宮體肌層以外的其他部位的婦科常見疾病，嚴(yán)重影響婦女身心健康.疼痛（包括痛經(jīng)、性交痛和慢性盆腔痛等）和不孕是內(nèi)異癥的主要臨床癥狀，其患病率在育齡婦女中達(dá)10-15％。雖然內(nèi)異癥發(fā)病率呈現(xiàn)增高趨勢(shì)，但其病因和發(fā)病機(jī)制以及相應(yīng)內(nèi)異癥疼痛的發(fā)生機(jī)制至今仍然不清。近年大量研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)異癥病灶內(nèi)出血刺激導(dǎo)致無菌性炎癥，免疫炎癥以及病

2、灶神經(jīng)異常生長(zhǎng)導(dǎo)致中樞與外周神經(jīng)敏化可能是內(nèi)異癥疼痛的主要發(fā)病機(jī)制。
　　肥大細(xì)胞(Mast cells，MC)是免疫炎癥反應(yīng)中的重要細(xì)胞之一，一些學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)MC脫顆粒與偏頭痛、間質(zhì)性膀胱炎、腸易激綜合癥、異位性皮炎等疾病的疼痛癥狀有明顯的相關(guān)性。在神經(jīng)病理性疼痛中，分布于神經(jīng)和神經(jīng)周圍組織的MC即可脫顆粒釋放類胰蛋白酶、腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)、神經(jīng)肽、P物質(zhì)(Substanc

3、e P，SP)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子（Nerve growth factor，NGF）、細(xì)胞因子以及神經(jīng)遞質(zhì)如乙酰膽堿等活性介質(zhì)導(dǎo)致神經(jīng)敏化，而敏化的神經(jīng)可釋放大量神經(jīng)遞質(zhì)反過來激活MC促使其脫顆粒釋放致痛物質(zhì)，進(jìn)一步促進(jìn)神經(jīng)敏化，從而導(dǎo)致神經(jīng)病理性疼痛的持續(xù)狀態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)異癥病灶存在MC數(shù)量增加以及其活性增強(qiáng)，且病灶中MC與神經(jīng)纖維之間密切相關(guān)。內(nèi)異癥疼痛目前認(rèn)為也是一種內(nèi)臟和神經(jīng)病理性疼痛，因而MC在內(nèi)異癥疼痛發(fā)生機(jī)制中發(fā)揮作用。

4、>　　研究表明，雌激素可結(jié)合MC膜上ER-α啟動(dòng)快速的鈣離子流，促進(jìn)人及小鼠MC活化脫顆粒釋放相應(yīng)的介質(zhì)。色甘酸鈉是MC膜穩(wěn)定劑，能抑制其釋放介質(zhì)，其作用機(jī)制可能與MC78-kDa蛋白磷酸化有關(guān)。78-kDa蛋白由兩段與MC膜突蛋白同源的染色體組成，在細(xì)胞表面與細(xì)胞內(nèi)構(gòu)架之間通過調(diào)節(jié)性功能的連接而參與信號(hào)傳導(dǎo)，一旦膜突蛋白在磷酸化/脫磷酸化作用下結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，將導(dǎo)致細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的位置重排，并可能使MC分泌顆粒。
　　基于以

5、上研究，我們?cè)O(shè)計(jì)了本實(shí)驗(yàn)，首先建立SD大鼠內(nèi)異癥模型，在此基礎(chǔ)上我們給予MC脫顆粒促進(jìn)劑（雌激素）及抑制劑（色甘酸鈉）干預(yù)后，觀察模型病灶大小變化以及與MC脫顆粒的關(guān)系，探討MC在內(nèi)異癥發(fā)病中的作用，為臨床內(nèi)異癥疼痛的治療提供新思路。
　　目的:
　　探討肥大細(xì)胞在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)理中的作用。
　　材料和方法:
　　取健康雌性未孕SD大鼠60只，采用自體子宮內(nèi)膜移植法建立大鼠腹壁內(nèi)異癥模型，分兩部分進(jìn)行:第一

6、部分（每組8只）大鼠造模后即每天臀部肌肉注射不同劑量雌激素（高劑量組:造模時(shí)同時(shí)切除雙側(cè)卵巢后給予外源性雌激素200μg/kg，低劑量組:造模時(shí)同時(shí)切除雙側(cè)卵巢后給予外源性雌激素100μg/kg，單純?cè)炷＝M:造模時(shí)不切除雙側(cè)卵巢不給予外源性雌激素），兩周后觀察其對(duì)大鼠內(nèi)異癥病灶的大小，組織形態(tài)的影響，每組處死4只大鼠取材，剩余大鼠繼續(xù)注射相應(yīng)劑量雌激素兩周，取材，比較病灶MC總數(shù)及其脫顆粒數(shù)、類胰蛋白酶、NGF的表達(dá)，血清TNF-α、雌

7、二醇(Estradiol，E2)水平;第二部分（分別10只、10只、8只、8只）大鼠造模兩周后觀察大鼠內(nèi)異癥病灶的大小，隨后每天腹腔注射不同劑量色甘酸鈉（高劑量組20 mg/kg，低劑量組10 mg/kg，溶劑組，空白對(duì)照組），連續(xù)用藥兩周處死取材，檢測(cè)指標(biāo)同上。
　　統(tǒng)計(jì)方法
　　SPSS20.0軟件進(jìn)行分析，結(jié)果以(X)±S表示，進(jìn)行正態(tài)性和方差齊性檢驗(yàn)，多組間數(shù)據(jù)比較用單因素方差分析，兩組間數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)

8、取0.05.
　　結(jié)果:
　　1.雌激素干預(yù)組兩周和四周時(shí)血清E2濃度均顯著高于單純?cè)炷＝M（P＜0.05），四周時(shí)高劑量雌激素干預(yù)組血清TNF-α濃度顯著高于單純?cè)炷＝M(P＜0.05)。
　　2.雌激素干預(yù)組兩周和四周病灶體積顯著大于單純?cè)炷＝M(P＜0.05)。
　　3.無論是兩周還是四周，低劑量雌激素干預(yù)組甲苯胺藍(lán)染色脫顆粒/總的MC數(shù)比值顯著高于單純?cè)炷＝M(P＜0.05)。
　　4.雌激素干預(yù)組與單純?cè)?/p>

9、模組間病灶類胰蛋白酶的表達(dá)未見明顯差異(P＞0.05)，四周時(shí)高劑量雌激素組NGF的表達(dá)顯著高于單純?cè)炷＝M(P＜0.05)。
　　5.色甘酸鈉治療組與溶劑組、空白對(duì)照組間血清E2水平無明顯差異(P＞0.05)，色甘酸鈉高劑量治療組血清TNF-α濃度顯著低于溶劑組和空白對(duì)照組(P＜0.05)。
　　6.色甘酸鈉干預(yù)組兩周和四周時(shí)病灶體積與溶劑組、空白對(duì)照組均無明顯差異(P＞0.05)。
　　7.色甘酸鈉高劑量治療組甲苯胺

10、藍(lán)染色活化的MC數(shù)顯著顯著低于溶劑組(P＜0.05)，脫顆粒/總的MC數(shù)比值顯著低于溶劑組和空白對(duì)照組(P＜0.05)。
　　8.色甘酸鈉高劑量治療組類胰蛋白酶表達(dá)顯著低于溶劑組和空白對(duì)照組(P＜0.05)，色甘酸鈉治療組NGF的表達(dá)略低于溶劑組和空白對(duì)照組，但統(tǒng)計(jì)學(xué)上無明顯差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.雌激素可促進(jìn)內(nèi)異病灶的生長(zhǎng)，可通過激活肥大細(xì)胞，促使其脫顆粒釋放TNF-α、NGF介導(dǎo)內(nèi)異癥的發(fā)病。<