環(huán)境與基因的交互作用對(duì)早期自然流產(chǎn)的影響.pdf

1、目的:
　　早期自然流產(chǎn)（early miscarriage，EM）雖經(jīng)大量研究，由于病因復(fù)雜，機(jī)制不清，缺乏預(yù)防及早期診斷、早期治療的方法。隨著對(duì)基因功能研究的深入，基因和環(huán)境與疾病的關(guān)聯(lián)已經(jīng)成為疾病研究的新策略。目前關(guān)于EM的研究較為局限，雖已知自身免疫紊亂在EM發(fā)病過(guò)程中具有重要作用，但其發(fā)生發(fā)展過(guò)程中環(huán)境因素的致病風(fēng)險(xiǎn)、環(huán)境與基因交互作用的影響及其與機(jī)體自身免疫紊亂的關(guān)系研究報(bào)道較少。為此采用流行病學(xué)調(diào)查、環(huán)境與基因交互作

2、用分析、免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞檢測(cè)等研究方法，探討環(huán)境、基因、免疫等因素對(duì)EM的影響及其相互關(guān)聯(lián)，為闡明EM的危險(xiǎn)因素、發(fā)病機(jī)制、早期預(yù)防和治療等提供相關(guān)科學(xué)依據(jù)。
　　研究方法:
　　1.流行病學(xué)調(diào)查:應(yīng)用基于醫(yī)院調(diào)查的病例對(duì)照研究方法，采用問(wèn)卷調(diào)查方式，調(diào)查鄭州市三家省市級(jí)醫(yī)院640例妊娠早期流產(chǎn)患者和1280例中晚期正常圍產(chǎn)保健妊娠婦女生活環(huán)境情況，分析環(huán)境因素對(duì)妊娠、流產(chǎn)的影響。
　　2.基因多態(tài)性及交互作用分析:對(duì)所有

3、調(diào)查對(duì)象提取全基因組DNA，分析抑制性免疫調(diào)節(jié)基因Foxp3基因的兩個(gè)位點(diǎn)rs3761548、rs5953280和CTLA-4基因的2個(gè)位點(diǎn)rs231775和rs5742909的多態(tài)性，采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS21.0擬合Logistic和MDR軟件分析基因-基因、基因-環(huán)境的交互作用對(duì)流產(chǎn)的影響。
　　3.血清PAEs及Treg檢測(cè):以從事服裝銷售的女性EM患者65例和正常妊娠者49例、非銷售職業(yè)的EM患者65例和正常妊娠者70例為

4、研究對(duì)象，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血及流產(chǎn)胚胎蛻膜組織中調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Treg)的分布變化，采用高效液相色譜法檢測(cè)血清中鄰苯二甲酸酯類(PAEs)中鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、苯二甲酸二異辛酯(DEHP)水平，初步探討環(huán)境污染物和Treg數(shù)量變化與EM的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1.銷售職業(yè)、自然流產(chǎn)史、主動(dòng)流產(chǎn)史、熬夜、夜班可能是早期流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)因子:單因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，從事銷

5、售(OR=2.417，95％CI=1.384～2.918)和財(cái)務(wù)職業(yè)(OR=1.632，95％CI=1.113～2.272)的女性易于自然流產(chǎn);既往的自然流產(chǎn)史（OR=2.583，95％CI=1.197～4.069）和主動(dòng)流產(chǎn)史（OR=1.872，95％CI=1.066～2.849）是妊娠早期流產(chǎn)的危險(xiǎn)因素;經(jīng)常值夜班（OR=1.473，95％CI=1.113～1.842）和經(jīng)常熬夜(OR=1.464，95％CI=1.072～2.820

6、)是妊娠早期流產(chǎn)的危險(xiǎn)因素;孕前緊張(OR=1.345，95％CI=1.013～1.626)和工作壓力過(guò)大（OR=1.462，95％CI=1.172～1.716）也是流產(chǎn)的危險(xiǎn)因素;而妊娠前補(bǔ)充復(fù)合維生素（OR=0.761，95％CI=0.485～0.923）和適當(dāng)體育鍛煉（OR=0.735，95％CI=0.512～0.913）是妊娠早期流產(chǎn)的保護(hù)性因素。經(jīng)多因素分析后，銷售職業(yè)（OR=2.417）、自然流產(chǎn)史（OR=3.166）、主動(dòng)

7、流產(chǎn)史（OR=2.396）、夜班（OR=1.473）、熬夜(OR=1.464)等5種因素顯著增加了流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn);而體育鍛煉（OR=0.735）、補(bǔ)充復(fù)合維生素（OR=0.761）則是流產(chǎn)的保護(hù)性因素。
　　2.Foxp3基因rs3761548的風(fēng)險(xiǎn)等位基因C在病例組與對(duì)照組的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=4.927，P=0.012)。突變純合子CC在流產(chǎn)組中顯著高于對(duì)照組(x2=6.387，P=0.011)，以及隱性遺傳模型能增加疾病

8、的風(fēng)險(xiǎn)(OR=1.275，95％CI=1.012～1.417)，F(xiàn)oxp3的rs5953280位點(diǎn)與妊娠早期流產(chǎn)無(wú)明顯關(guān)聯(lián)。CTLA-4的2個(gè)位點(diǎn)rs5742909、rs231775與妊娠早期流產(chǎn)無(wú)明顯關(guān)聯(lián)。
　　3.用Logistic回歸模型分析兩兩位點(diǎn)間交互作用，調(diào)整了職業(yè)、自然流產(chǎn)史、主動(dòng)流產(chǎn)史、夜班、熬夜、體育鍛煉、補(bǔ)充復(fù)合維生素等因素后，結(jié)果顯示四位點(diǎn)間均未見(jiàn)交互作用。用Logistic回歸模型分析四位點(diǎn)與環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)因子進(jìn)

9、行一階交互作用，也未發(fā)現(xiàn)明顯的交互效應(yīng)。當(dāng)采用多因子降維法(multifactor dimensionality reduction，MDR)進(jìn)行高階交互分析時(shí)，發(fā)現(xiàn)最佳的交互模型是自然流產(chǎn)史、夜班、熬夜、rs3761548的四因子交互模型，該模型的檢驗(yàn)平衡集精度為0.62，交叉驗(yàn)證率為90％，模型P值為0.01。
　　4.服裝銷售病例組血清DBP水平[0.454±0.386(μg/ml)]高于非銷售對(duì)照組血清DBP水平[0.21

10、6±0.155(μg/ml)]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=O.001);服裝銷售病例組外周血及蛻膜組織中Treg[(0.937±0.212)％，(1.136±0.428)％)]顯著低于非銷售對(duì)照組[(1.327±0.438)％，(2.115±0.498)％)]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（兩組P=0.000）。服裝銷售組的血清DBP水平與其外周血Treg數(shù)量負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.在中國(guó)漢族育齡期女性人群中，從事銷售

11、職業(yè)、有自然流產(chǎn)史、主動(dòng)流產(chǎn)史、夜班工作和經(jīng)常熬夜能顯著增加妊娠早期自然流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn);而孕前補(bǔ)充復(fù)合維生素、適當(dāng)?shù)捏w育鍛煉則可以降低自然流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)。
　　2.Foxp3基因的rs3761548位點(diǎn)可增加中國(guó)漢族育齡期女性妊娠早期自然流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn);而且自然流產(chǎn)史、夜班、熬夜以及rs3761548位點(diǎn)四因素之間存在交互效應(yīng)，能增加流產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)。
　　3.服裝銷售女性血清DBP水平高于非銷售女性，可能影響外周血Treg數(shù)量;早期自然流產(chǎn)可