細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白Nbs1的轉(zhuǎn)錄調(diào)控及功能.pdf

1、Nbs1是細(xì)胞應(yīng)答DNA損傷時(shí)起重要作用的蛋白，特別是在應(yīng)答DNA雙鏈斷裂時(shí)。它在DSB監(jiān)測、DNA損傷應(yīng)答、細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)、DNA損傷的修復(fù)和DNA復(fù)制中都起到重要作用，對(duì)維持基因組的保真性和細(xì)胞的存活有重要貢獻(xiàn)。雖然有報(bào)道c-Myc可以調(diào)控Nbs1的表達(dá)，但是關(guān)于Nbs1的轉(zhuǎn)錄調(diào)控的具體機(jī)制未見報(bào)道。c-Myc是一個(gè)泛在性轉(zhuǎn)錄因子，在細(xì)胞中調(diào)控了大量的靶基因，影響許多細(xì)胞進(jìn)程，包括了細(xì)胞增殖、生長、凋亡、能量代謝、分化等。c-Myc

2、的表達(dá)失調(diào)與腫瘤發(fā)生和治療密切相關(guān)，關(guān)于c-Myc對(duì)腫瘤細(xì)胞的藥物敏感性的影響及其機(jī)制還有待闡明。本文探討了Nbs1的表達(dá)調(diào)控的機(jī)制和意義以及c-Myc對(duì)腫瘤細(xì)胞的藥物敏感性與Nbs1和DNA修復(fù)機(jī)制的關(guān)系。我們的研究證實(shí)了Nbs1是c-Myc的靶基因，存在于Nbs1啟動(dòng)子區(qū)的兩個(gè)E-box序列對(duì)c-Myc結(jié)合是重要的。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也顯示，組蛋白乙?；竝300參與Nbs1的表達(dá)調(diào)控，p300促進(jìn)Nbs1的表達(dá)。染色質(zhì)免疫沉淀表明c-

3、Myc招募p300到Nbs1啟動(dòng)子，而且引起了Nbs1啟動(dòng)子區(qū)的組蛋白H4乙?；Ｍㄟ^點(diǎn)突變和染色質(zhì)免疫沉淀我們確定了Nbs1啟動(dòng)子區(qū)的兩個(gè)E-box序列對(duì)c-Myc招募p300有重要作用。通過集落形成實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)c-Myc和Nbs1都可以降低骨肉瘤細(xì)胞U2OS的阿霉素敏感性。通過小RNA干涉和補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn)c-Myc對(duì)阿霉素作用的影響與其調(diào)控Nbs1有關(guān)，增強(qiáng)DNA損傷修復(fù)能力可能是c-Myc影響阿霉素的療效的一個(gè)重要因素。