β1族整合蛋白過表達對人肝癌細胞細胞周期的調控及其機制研究.pdf

1、整合蛋白(integrins)是一類重要的細胞表面粘附分子,可以調節(jié)許多基本的細胞功能,例如細胞增殖、分化和凋亡等過程.一般來說,整合蛋白通過控制細胞—細胞外基質粘附結構的組裝與生長,進而促進細胞增殖或抑制細胞凋亡.但是在一些實體腫瘤中,例如肝癌細胞,整合蛋白表達水平通常較低.而且越來越多的實驗證據顯示,整合蛋白可能參與細胞周期的抑制性調節(jié).因此,我們擬從此方面著手以探討整合蛋白對細胞周期抑制性調控的作用及分子機制.首先,在肝癌細胞SM

2、MC-7721中建立整合蛋白α5和/或β1亞基基因穩(wěn)定表達株,觀察β1族整合蛋白過表達對細胞周期的影響.實驗發(fā)現,在β1族整合蛋白過表達細胞株β1-7721和α5β1-7721中,發(fā)現S期阻滯現象.隨后,我們進一步探討了這種細胞周期阻滯的分子機制.結果顯示,在β1-7721和α5β1-7721細胞中細胞周期素D1(cyclin D1)和CDK2的蛋白含量沒有明顯變化,而細胞周期抑制性調控因子p27<'KIP1>和p21<'CIP>蛋白表

3、達水平明顯增高.同時,在α5β1-7721和β1-7721細胞中,FAK的蛋白含量及其磷酸化水平均無明顯變化;PKB蛋白含量雖無變化,但其磷酸化程度卻降低.β1族整合蛋白過表達并不影響p27的mRNA水平.當應用wortmannin抑制PI3K活性以使PKB磷酸化水平降低時,p27蛋白表達呈上調趨勢;當在細胞粘附存在下PKB磷酸化增加時,p27蛋白水平卻下降.由此,我們推測,在β1族整合蛋白過表達引起S期阻滯的過程中,PKB活性變化起了