上下呼吸道纖毛功能內(nèi)在差異性的比較研究.pdf

1、目的:黏液纖毛清除功能(MCC)是呼吸系統(tǒng)抵抗環(huán)境中各種病原體、污染物侵襲的第一道防線。纖毛擺動作為MCC的動力來源,對維持MCC的正常功能起到了至關(guān)重要的作用,纖毛擺動機(jī)制的研究雖已開展多年,但對其了解仍遠(yuǎn)未完善。臨床發(fā)現(xiàn)慢性鼻竇炎(CRS)可導(dǎo)致患者鼻腔MCC下降,但與此同時,CRS患者下呼吸道MCC存在異常的體征卻少有發(fā)現(xiàn)。這預(yù)示著上下呼吸道纖毛擺動功能可能存在著差異?；谝陨媳尘?本實(shí)驗(yàn)對各種狀態(tài)下,上下呼吸道上皮纖毛的擺動功能

2、開展了比較研究,以期闡明:各種狀態(tài)下,上下呼吸道纖毛擺動功能是否存在差異;通過比較研究,為纖毛擺動機(jī)制的研究開辟新的途徑。
　　材料與方法:體外建立“Puff"系統(tǒng),模擬“噴嚏”這一生理過程。觀察“噴嚏”對小鼠鼻腔上皮CBF的影響。使用抑制劑(Apyrase、Suramin、EGTA、BAPTA-AM和H-89)干預(yù)實(shí)驗(yàn),研究ATP、鈣離子(Ca2+)和蛋白激酶A(PKA)在這一過程中的作用。觀察“噴嚏”后,鼻腔、氣管上皮CBF反

3、應(yīng)性的差異。觀察上下呼吸道上皮細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)下CBF的差異,使用fura-2測定兩種上皮細(xì)胞中的Ca2+濃度。觀察綠膿桿菌分泌液對鼻腔、氣管上皮細(xì)胞基礎(chǔ)CBF和“噴嚏”后CBF反應(yīng)性的影響,并且,利用細(xì)菌分泌液對鼻腔、氣管上皮細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理后,觀察活體綠膿桿菌在上下呼吸道上皮表面附著能力的差異。
　　結(jié)果:“噴嚏”后鼻腔上皮CBF與“噴嚏”前CBF的比率為1.78±0.05,n=10,ATP、Ca2+以及PKA抑制劑可明顯抑制這一反

4、應(yīng)。氣管組中,“噴嚏”后CBF的升高比率僅為1.21±0.03,n=10,p＜0.01。氣管上皮基礎(chǔ)CBF約為鼻腔上皮基礎(chǔ)CBF的兩倍。氣管纖毛細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度為91.06±9.85nM,n=4,鼻腔組中這一數(shù)據(jù)為54.90±2.52nM,n=4,p＜0.05。綠膿桿菌分泌物在降低鼻腔上皮細(xì)胞基礎(chǔ)CBF的同時,也能夠抑制“噴嚏”后CBF的升高;氣管上皮CBF對綠膿桿菌分泌物的侵襲則具有抵抗力。鼻腔上皮細(xì)胞上細(xì)菌的貼敷數(shù)量在實(shí)驗(yàn)組及對照