心肌梗死后大鼠左心室肌細(xì)胞鈣濃度的改變及夾竹桃麻素的干預(yù)作用研究.pdf

1、目的：探討心肌梗死后大鼠左心室肌細(xì)胞鈣濃度的改變及夾竹桃麻素的干預(yù)作用。
　　方法：1.選擇體重230～260g健康雄性SD（Sprague Dawley）大鼠共90只，稱重后用10%水合氯醛腹腔注射麻醉并行氣管插管，開胸結(jié)扎左冠狀動脈前降支建立心肌梗死模型，假手術(shù)組（sham組）僅將縫線穿過前降支而不結(jié)扎。將心肌梗死大鼠隨機(jī)分為2個(gè)亞組，一組接受夾竹桃麻素（15mg/kg/d）灌胃給藥5周，設(shè)為心梗干預(yù)組（MI干預(yù)組），另一組給

2、予等體積生理鹽水灌胃5周，設(shè)為心肌梗死組（MI組）。第6周時(shí)將大鼠稱重后行腹腔麻醉，迅速開胸取出心臟，應(yīng)用酶解法分離獲得單個(gè)左心室肌細(xì)胞用于膜片鉗實(shí)驗(yàn)及心肌細(xì)胞內(nèi)鈣濃度測定，其中sham組5只，MI組6只，MI干預(yù)組6只。
　　2、采用酶解法分離獲得單個(gè)左心室肌細(xì)胞，應(yīng)用膜片鉗全細(xì)胞記錄技術(shù)記錄三組大鼠左心室肌細(xì)胞膜電容（Cm）和L-型鈣通道電流（ICa-L），測定每一刺激電壓下的電流幅值并計(jì)算每一刺激電壓下的電流密度，將每一刺激

3、電壓下的最大電流密度繪制成電流密度-電壓（I-V）曲線，并計(jì)算ICa-L的激活、失活時(shí)間常數(shù)。
　　3、采用酶解法分離獲得單個(gè)左心室肌細(xì)胞，應(yīng)用熒光探針 Fura-2/AM測定心室細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度。
　　結(jié)果：1、Sham組左心室肌細(xì)胞膜電容為（190.92±14.55）pF（n=12），MI組為（290.13±22.10）pF（n=10），二組間比較差異顯著（P<0.01）；MI干預(yù)組為（201.26±13.20）pF（n

4、=11），顯著低于MI組（P<0.01），雖然高于sham組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　2、三組左心室肌細(xì)胞ICa-L在0mv電壓下電流密度分別為，sham組為（7.94±0.36） pA/pF（n=12），MI組為（5.88±0.74）pA/pF（n=10），兩者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），MI干預(yù)組為（7.40±0.41）pA/pF（n=11），與MI組相比，其電流密度顯著增加（P<0.01），比sham組電

5、流密度低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。三組ICa-L的激活電壓均為-40mv，峰值電壓為0mv，反轉(zhuǎn)電壓為+50mv，sham組、MI組及MI干預(yù)組ICa-L激活時(shí)間常數(shù)分別為（6.41±0.72）ms、（6.57±0.64）ms和（6.21±0.68）ms；快、慢失活時(shí)間常數(shù)分別為（7.82±2.33）ms、（82.56±4.17）ms；（7.54±2.95）ms、（81.39±3.76）ms；（7.62±2.58）ms、（83

6、.06±4.76）ms，均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　3、Sham組左心室肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度為（168.57±80.46）nmol/L（n=14），MI組為（381.21±84.19）nmol/L（n=10），二組間比較差異顯著（P<0.01）；MI干預(yù)組為（245.79±92.11）nmol/L（n=10），顯著低于MI組（P<0.01），高于sham組，但無顯著性差異。
　　結(jié)論:
　　1. MI組大鼠左

7、心室非梗死區(qū)心肌細(xì)胞膜電容較sham組明顯增高，應(yīng)用夾竹桃麻素干預(yù)后顯著下降，表明抑制NADPH氧化酶可減輕心肌梗死后大鼠左心室肌細(xì)胞肥大。
　　2.MI組大鼠左心室非梗死區(qū)心肌細(xì)胞0mv時(shí)ICa-L電流密度較sham組顯著降低， I-V曲線明顯上移，應(yīng)用夾竹桃麻素后ICa-L電流密度明顯升高，表明抑制NADPH氧化酶可減輕心肌梗死后大鼠左心室肌細(xì)胞ICa-L重構(gòu)。
　　3.MI組大鼠左心室非梗死區(qū)心肌細(xì)胞內(nèi)鈣濃度較sham