側(cè)腦室注射共軛亞油酸（CLA）的外周效應(yīng)研究.pdf

1、共軛亞油酸(conjugated linoleic acids, CLA)是一組天然存在的具有18個(gè)碳原子，含有共軛雙鍵的多不飽和脂肪酸，是必需脂肪酸-亞油酸(linoleic acid,LA)的異構(gòu)體。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)：CLA 有減輕肥胖、抗腫瘤、防止動(dòng)脈粥樣硬化、提高機(jī)體免疫力、增加骨密度、促進(jìn)生長(zhǎng)等多種生理功能，其中減輕肥胖的作用最受到研究者的重視。已有的研究顯示，CLA減輕肥胖的作用是通過多途徑、多因素發(fā)揮作用的，中樞神經(jīng)系統(tǒng)（C

2、NS）也是可能的途徑之一。中樞神經(jīng)肽、神經(jīng)遞質(zhì)和激素在體重調(diào)節(jié)中起著非常重要的角色。有關(guān)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的儲(chǔ)存、飽腹感、對(duì)食物的口感等等都通過內(nèi)分泌激素、營(yíng)養(yǎng)代謝的信號(hào)或是聯(lián)絡(luò)大腦與外周的神經(jīng)通路與腦發(fā)生關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)通過給SD 大鼠側(cè)腦室注射CLA，與非共軛的亞油酸（LA）進(jìn)行比較，觀察大鼠體重、食欲、血脂、leptin 及腦組織NPY、AgRP、POMCmRNA、肝臟組織CPT-1mRNA的表達(dá)，以證明CLA能夠通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)全身的營(yíng)養(yǎng)

3、代謝，為人們用CLA的食物預(yù)防和治療肥胖提供理論基礎(chǔ)。 實(shí)驗(yàn)方法: 雄性成年SD大鼠，單籠飼養(yǎng)，正常飲食。實(shí)驗(yàn)分組：NS對(duì)照組：腦室內(nèi)注射生理鹽水（N.S.），0.5 μl/只；LA對(duì)照組：腦室內(nèi)注射亞油酸（LA），0.5 μl/只（150nmol）；CLA 對(duì)照組：腦室內(nèi)注射共軛亞油酸（CLA），0.5μl/只（150nmol）。將大鼠麻醉后，固定于腦立體定向儀。坐標(biāo)參考Bregma 圖譜：前囟后0.92mm，矢狀縫旁

4、開1.4mm，腦表面下3.3mm。牙科鉆鉆開顱骨，暴露硬腦膜。微量注射器側(cè)腦室注射CLA0.5μl（150nmol）。分別于注射后2、4、8、12、24 小時(shí)減尾采血，取動(dòng)物血清，用試劑盒法測(cè)定血清中血脂水平，放射免疫法測(cè)Leptin濃度；分別于2、4、8、14天處死動(dòng)物，取臟器組織，稱重，用RT-PCR法測(cè)腦組織中NPY、AgRP、POMCmRNA表達(dá)和肝臟組織中CPT-1mRNA表達(dá)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 1、側(cè)腦室注射CL

5、A 對(duì)大鼠體重、食欲的影響： (1) 大鼠體重的變化：側(cè)腦室注射后，CLA 組動(dòng)物體重持續(xù)降低，與NS 對(duì)照組（第4 天后）和LA對(duì)照組（第14天）相比有顯著性差異（p＜0.05）。 (2)CLA對(duì)攝食量的影響：與注射生理鹽水相比，注射LA和CLA都能夠引起大鼠食欲的下降，但是與LA組相比（6天），CLA作用的時(shí)間更為持久（＞8天）。 （3）腦組織食欲肽mRNA 表達(dá)的改變：側(cè)腦室注射后第2，4，8 天，CLA

6、注射組大鼠下丘腦NPYmRNA表達(dá)水平低于LA對(duì)照組和NS對(duì)照組（p＜0.05），與NS對(duì)照組相比下降了大約60％； CLA注射組大鼠下丘腦AgRP mRNA表達(dá)水平低于LA對(duì)照組和NS對(duì)照組（p＜0.05），與NS對(duì)照組相比下降了大約75％；CLA注射組和LA對(duì)照組大鼠下丘腦POMC mRNA表達(dá)水平基本正常。 2、側(cè)腦室注射CLA 對(duì)大鼠脂肪代謝的影響： （1）對(duì)脂肪分布的影響：與LA組和NS組相比，注射CLA組的皮

7、下脂肪、睪周脂肪和脂體比均有顯著的改變（p＜0.05）； （2）大鼠血脂的改變：注射CLA后2小時(shí)血清甘油三酯有顯著的增高（p＜0.05）；注射CLA2 小時(shí)左右血清總膽固醇有顯著的降低（p＜0.05）；注射CLA4 小時(shí)左右血清高密度脂蛋白有顯著的增高（p＜0.05）；側(cè)腦室注射CLA2小時(shí)后血清瘦素開始升高，一直持續(xù)到12小時(shí)（p＜0.05）。 （3）對(duì)肝臟脂質(zhì)沉積的影響：注射CLA后肝臟內(nèi)甘油三酯含量減少；肝臟CP

8、T-1mRNA表達(dá)增高，與注射前相比有顯著差異（p＜0.05）。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論: 1．側(cè)腦室注射CLA后大鼠體重減輕，食欲下降； 2．CLA抑制食欲的效應(yīng)是通過影響NPY和AgRPmRNA表達(dá)發(fā)揮作用的； 3．側(cè)腦室注射CLA能夠影響短期（48h）內(nèi)血脂水平，能夠減少肝臟組織的脂質(zhì)沉積； 4．CLA影響脂質(zhì)沉積的機(jī)制可能與增強(qiáng)CPT-1 的表達(dá)有關(guān)。 5．中樞神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)機(jī)體食物攝取和能量代謝的