EGFRvⅢ促肝癌遷移侵襲的分子機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討EGFRvⅢ促肝癌遷移侵襲的分子機(jī)制
　　方法：應(yīng)用比較蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)比分析Huh-7-EGFR與Huh-7-EGFRvⅢ兩種細(xì)胞的差異表達(dá)蛋白，并通過Real-time quantitative PCR驗(yàn)證差異表達(dá)蛋白的差異；將差異表達(dá)明顯的S100A11、Cofilin-1基因用慢病毒表達(dá)系統(tǒng)分別導(dǎo)入Huh-7細(xì)胞，構(gòu)建Huh-7-S100A11、Huh-7-Cofilin-1這兩種細(xì)胞系，并檢測細(xì)胞遷移侵襲的能力

2、；再用RNA干擾技術(shù)沉默Huh-7-EGFRvⅢ細(xì)胞中的S100A11、Cofilin-1，然后檢測細(xì)胞的遷移侵襲能力是否有改變；利用Real-time quantitative PCR檢測20對(duì)肝癌及癌旁組織中EGFRvⅢ與S100A11、Cofilin-1的表達(dá)情況并分析其相關(guān)性。
　　結(jié)果：Huh-7-EGFR與Huh-7-EGFRvⅢ兩種細(xì)胞的比較蛋白質(zhì)組學(xué)分析結(jié)果顯示存在5個(gè)差異蛋白：鈣囊素（S100A11）、過氧化物酶

3、-1（Peroxiredoxin1）、原肌球蛋白3-2亞型（人原肌球蛋白，Tropomyosin3 isoform2）、核仁磷蛋白-2亞型（Nucleophosmin1 isoform2）、絲切蛋白（Cofilin-1）；其中S100A11, Cofilin-1基因表達(dá)差異最明顯，遷移侵襲實(shí)驗(yàn)表明S100A11, Cofilin-1轉(zhuǎn)染后均可增強(qiáng)Huh-7細(xì)胞的遷移侵襲能力（P<0.05）；而干擾了Huh-7-EGFRvⅢ細(xì)胞中S100