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1、目的:從CAV病毒中克隆出Apoptin基因,并構(gòu)建能同時表達Apoptin和反義PCNA的真核表達載體.檢測Apoptin誘導(dǎo)凋亡的情況,觀察Apoptin和反義PCNA協(xié)同殺傷癌細胞的效果.方法:1.提取病毒基因組DNA,利用PCR反應(yīng)擴增出所需基因;2.構(gòu)建能同時表達Apoptin和反義PCNA的真核表達載體,用RT-PCR檢測其表達;3.采用TUNEL、流式等方法檢測Apoptin誘導(dǎo)凋亡的效果;4.利用細胞計數(shù)、MTT、Ki-
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