參芪解毒湯對慢性腎功能衰竭大刀作用機(jī)制的分子生物學(xué)研究.pdf

1、目的：觀察參芪解毒湯(SQJDD)對治療后的慢性腎功能衰竭(CRF)大鼠腎組織的分子生物學(xué)影響，探討SQJDD治療慢性腎功能衰竭的機(jī)制。
　　 方法：
　　 (1)動(dòng)物模型復(fù)制
　　 將90只健康Wistar雄性大鼠隨機(jī)分成正常組、模型組、低劑量SQJDD組、中劑量SQJDD組和高劑量SQJDD組，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。采用2.5％的腺嘌呤灌胃4周來誘導(dǎo)大鼠形成慢性腎功能衰竭模型。
　　 (2)分子生物學(xué)檢測<

2、br>　　 模型復(fù)制后，通過檢測血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平來判斷是否造模成功。經(jīng)過SQJDD干預(yù)治療8周后，檢測SCr、BUN、24小時(shí)尿蛋白定量(24hrUP)、三酰甘油(TAG)、膽固醇(CHOL)、血清白蛋白(ALB)水平；處死大鼠，采用HE染色觀察各組大鼠腎臟組織的病理改變；應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測結(jié)締組織生長因子(CTGF)、血小板源性生長因子-B(PDGF-B)的表達(dá)情況；采用蛋白印跡法(Western bl

3、otting)檢測各組大鼠腎臟組織轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 (1)模型復(fù)制結(jié)果：腺嘌呤灌胃后，模型組及低、中、高劑量SQJDD組的SCr、BUN水平均較正常組明顯升高(P＜0.01)，提示慢性腎衰大鼠模型制作成功。
　　 (2)藥物干預(yù)結(jié)果：與治療前相比，低、中、高劑量SQJDD組的SCr、BUN水平明顯降低(P＜0.01)；治療后，各治療組的SCr

4、、BUN水平均低于模型組（P＜0.01），提示SQJDD可以降低SCr、BUN水平；治療后，各治療組24hrUP、CHOL水平均低于模型組(P＜0.01，P＜0.05)，ALB水平高于模型組(P＜0.01)，提示SQJDD可以降低24hrUP、CHOL，升高ALB;病理結(jié)果顯示，各治療組大鼠的腎臟組織病理損傷明顯輕于模型組，提示SQJDD能減輕腎組織損傷。免疫組化結(jié)果顯示，各治療組CTGF、PDGF-B在腎組織的表達(dá)均明顯低于模型組(P

5、＜0.01)，提示SQJDD可以減少腎衰大鼠腎組織的CTGF、PDGF-B的表達(dá)；蛋白印跡法檢測結(jié)果顯示，各治療組腎組織的TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表達(dá)均低于模型組（P＜0.01），提示SQJDD可減少腎衰大鼠腎組織的TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)論：SQJDD可能是通過減少CTGF、PDGF-B、TGF-β1、Smad2、Smad3在腎組織的表達(dá)來減輕大鼠腎組織損傷，防止腎功能惡化、延