運(yùn)動(dòng)性骨疲勞大鼠骨代謝與骨調(diào)因子的研究.pdf

1、研究目的：運(yùn)動(dòng)性骨疲勞是年輕運(yùn)動(dòng)員的常見(jiàn)現(xiàn)象，也是一直困擾運(yùn)動(dòng)員的一個(gè)棘手問(wèn)題，但目前關(guān)于運(yùn)動(dòng)性骨疲勞的發(fā)生機(jī)理尚不清楚。本研究從建立運(yùn)動(dòng)性骨疲勞動(dòng)物模型入手，從骨密度、骨生物力學(xué)、骨代謝生化標(biāo)志物、骨調(diào)因子的蛋白和基因表達(dá)等不同層面，分析運(yùn)動(dòng)性骨疲勞發(fā)生時(shí)骨變化的特點(diǎn)，探討運(yùn)動(dòng)性骨疲勞的發(fā)生機(jī)理。
　　 研究方法：66只8周齡雌性SD大鼠，隨機(jī)分為三組：運(yùn)動(dòng)性骨疲勞動(dòng)物模型組(36只)，對(duì)照組(20只，其中10只籠養(yǎng)8周)，一

2、次性大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組(10只)；其中運(yùn)動(dòng)性骨疲勞動(dòng)物模型組進(jìn)行4周大強(qiáng)度跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，造模期間每周對(duì)大鼠進(jìn)行99mTc—MDP骨顯影監(jiān)測(cè)，并進(jìn)行骨剛度(stiffness)、血清堿性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、雌激素(E2)指標(biāo)變化的測(cè)定，當(dāng)確診達(dá)到運(yùn)動(dòng)性骨疲勞標(biāo)準(zhǔn)后，完成運(yùn)動(dòng)性骨疲勞動(dòng)物模型的建立過(guò)程。將運(yùn)動(dòng)性骨疲勞大鼠隨機(jī)分為兩組，分別進(jìn)行自由恢復(fù)和積極運(yùn)動(dòng)干預(yù)恢復(fù)，時(shí)間均為4周，采用DXA法測(cè)定脛骨BMD、BMC含量

3、，在Anuda微機(jī)控制電子萬(wàn)能試驗(yàn)機(jī)上用三點(diǎn)彎曲法測(cè)定脛骨生物力學(xué)指標(biāo)，雙抗體夾心酶標(biāo)免疫分析法測(cè)定血清E2含量，比色法測(cè)定血清ALP、TRAP含量，免疫組化法檢測(cè)脛骨組織ER和TGF—β1蛋白表達(dá)，RT—PCR法測(cè)定脛骨組織ER、TGF—β1、BMP、OPG和OPGL基因轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)。
　　 研究結(jié)果：(1)4周大強(qiáng)度跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致脛骨剛度顯著下降(—33％)，骨99mTc—MDP顯影顯著上升(P＜0.05)，血清E2顯著下降

4、(P＜0.05)，ALP含量極顯著下降(P＜0.01)，TRAP極顯著升高(P＜0.01)，根據(jù)骨疲勞標(biāo)準(zhǔn)證實(shí)本研究成功建立運(yùn)動(dòng)性骨疲勞動(dòng)物模型；一次性大強(qiáng)度跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)沒(méi)有引起大鼠發(fā)生上述指標(biāo)的顯著改變。(2)運(yùn)動(dòng)性骨疲勞雌性大鼠血清ALP極顯著下降(P＜0.01)，E2含量顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，血清TRAP含量顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)。(3)運(yùn)動(dòng)性骨疲勞雌性大鼠脛骨BMD、最大載荷、剛度、最大應(yīng)力、彈性模量均極顯著低于對(duì)

5、照組(P＜0.01)，BMC、最大能量吸收均顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，一次性大強(qiáng)度跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)組大鼠骨量和生物力學(xué)指標(biāo)均無(wú)顯著改變。(4)運(yùn)動(dòng)性骨疲勞雌性大鼠骨組織ER、TGF—β1蛋白表達(dá)均極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，ER、TGF—β1、BMP基因轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)均顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，OPG基因轉(zhuǎn)錄水平極顯著下降(P＜0.01)，OPGL基因轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，一次性大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組大鼠蛋白和基因表

6、達(dá)均未發(fā)生顯著改變。(5)運(yùn)動(dòng)性骨疲勞雌性大鼠上述指標(biāo)，經(jīng)過(guò)4周適宜運(yùn)動(dòng)和自由恢復(fù)后，組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 研究結(jié)論：經(jīng)過(guò)4周大強(qiáng)度跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，本研究成功建立大鼠運(yùn)動(dòng)性骨疲勞模型，而一次性大強(qiáng)度跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)不能引起骨疲勞；運(yùn)動(dòng)性骨疲勞大鼠雌激素水平下降，骨形成指標(biāo)下降，骨吸收指標(biāo)升高，發(fā)生骨代謝紊亂，脛骨骨密度降低，脛骨生物力學(xué)性能降低，是運(yùn)動(dòng)性骨疲勞大鼠骨機(jī)械性能下降的基礎(chǔ)；運(yùn)動(dòng)性骨疲勞大鼠ER表達(dá)的降低是運(yùn)動(dòng)性骨疲勞發(fā)生機(jī)