MiRNA-200c與癌基因Bmi-1在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)及相關(guān)性研究.pdf

1、目的：應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)miRNA-200c和Bmi-1基因在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)，并結(jié)合Western-blot檢測(cè)膀胱尿路上皮癌中Bmi-1蛋白的表達(dá)情況，探討兩者在膀胱癌中的臨床意義，初步揭示Bmi-1和miRNA-200c在膀胱尿路上皮癌中的作用及兩者之間的相互關(guān)系。
　　 方法：選取2011年8月至2012年6月期間于我院行手術(shù)切除治療的膀胱尿路上皮癌新鮮腫瘤標(biāo)本20例，新鮮癌旁標(biāo)本10例作為對(duì)照。應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PC

2、R方法檢測(cè)腫瘤和癌旁標(biāo)本中Bmi-1和miRNA-200c的表達(dá)情況，同時(shí)應(yīng)用Western-blot檢測(cè)腫瘤和癌旁標(biāo)本的Bmi-1蛋白表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本中，按照2004年WHO病理分級(jí)，低分級(jí)尿路上皮癌組12例，高分級(jí)（包括浸潤(rùn)性）尿路上皮癌組8例。按照TNM臨床分期標(biāo)準(zhǔn):Tis～T1期9例，T2～T4期11例。
　　 結(jié)果：⑴RT-PCR檢測(cè)10例膀胱癌組織和10例對(duì)應(yīng)的癌旁組織的Bmi-1表達(dá)，結(jié)果顯示膀胱癌組織中Bmi

3、-1相對(duì)表達(dá)量0.843±0.232;癌旁組織Bmi-1相對(duì)表達(dá)量為0.167±0.031，兩者相比統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著的差異(P＜0.01)。⑵分析其中10例膀胱癌組織和10例對(duì)應(yīng)的癌旁組織的miRNA-200c的PCR結(jié)果，結(jié)果顯示膀胱癌組織miRNA-200c相對(duì)表達(dá)量為0.219±0.039;癌旁組織miRNA-200c相對(duì)表達(dá)量為0.026±0.008;兩者相比統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著的差異(P＜0.01)。⑶Western-blot

4、檢測(cè)其中6例膀胱癌組織和6例對(duì)應(yīng)的癌旁組織的Bmi-1蛋白表達(dá)，結(jié)果顯示在膀胱癌組織Bmi-1蛋白相對(duì)表達(dá)量為0.861±0.129;癌旁組織Bmi-1蛋白相對(duì)表達(dá)量為0.169±0.049;兩者相比統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著的差異(P＜0.01)。⑷RT-PCR檢測(cè)20例膀胱癌組織的miRNA-200c表達(dá)，按其表達(dá)量從高至低排序，把前10組定為miRNA-200c高表達(dá)組，后10組定為低表達(dá)組。高表達(dá)組Bmi-1相對(duì)表達(dá)量為0.201±0.

5、043;低表達(dá)組Bmi-1相對(duì)表達(dá)量為:0.835±0.193;兩者相比統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著的差異(P＜0.01)。⑸miRNA-200c高表達(dá)組Bmi-1蛋白相對(duì)表達(dá)量為0.605±0.089;低表達(dá)組Bmi-1蛋白相對(duì)表達(dá)量為1.118±0.177;兩者相比統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著的差異(P＜0.01)。⑹RT-PCR檢測(cè)20例膀胱癌組織的miRNA-200c表達(dá)，病理分級(jí)高級(jí)別組miRNA-200c相對(duì)表達(dá)量0.103±0.033，低級(jí)別組miR

6、NA-200c相對(duì)表達(dá)量0.269±0.076，兩者間差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。不同臨床分期中，Tis～T1組miRNA-200c相對(duì)表達(dá)量0.189±0.021，T2～T4組相對(duì)表達(dá)量:0.034±0.017，兩組相比統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著的差異(P＜0.01)。⑺通過(guò)RT-PCR檢測(cè)20例膀胱癌組織的Bmi-1表達(dá)，病理分級(jí)高級(jí)別組Bmi-1相對(duì)表達(dá)量0.617±0.128，低級(jí)別組Bmi-1相對(duì)表達(dá)量0.231±0.088，

7、兩者間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。不同臨床分期中，Tis～T1組Bmi-1相對(duì)表達(dá)量:0.257±0.094，T2～T4組相對(duì)表達(dá)量:0.589±0.148，兩組相比統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著的差異(P＜0.01)。⑻通過(guò)Western-blot檢測(cè)20例膀胱癌組織的Bmi-1蛋白表達(dá)，高級(jí)別組Bmi-1蛋白相對(duì)表達(dá)量1.032±0.328，低級(jí)別組Bmi-1蛋白相對(duì)表達(dá)量0.327±0.108，兩者間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。不同臨

8、床分期中，Tis～T1組Bmi-1蛋白相對(duì)表達(dá)量0.213±0.079，T2～T4組相對(duì)表達(dá)量0.911±0.232，兩組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。說(shuō)明患者病理分級(jí)和分期越高，Bmi-1蛋白表達(dá)量越高，病理分級(jí)和分期越低，Bmi-1蛋白表達(dá)量越低。與前面RT-PCR結(jié)果一致。
　　 結(jié)論：①膀胱尿路上皮癌及癌旁組織中均表達(dá)Bmi-1，且在腫瘤組織中其表達(dá)量明顯高于癌旁組織(P＜0.01);膀胱尿路上皮癌及癌旁組織中均

9、表達(dá)miRNA-200c，且在腫瘤組織中其表達(dá)量明顯高于癌旁組織(P＜0.01)。說(shuō)明Bmi-1和miRNA-200c均與膀胱尿路上皮癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程密切相關(guān)。②臨床病理分級(jí)和分期越高，miRNA-200c的表達(dá)量越低;而隨著臨床病理分級(jí)分期越高，Bmi-1及其蛋白的表達(dá)量越高，提示miRNA-200c和Bmi-1的表達(dá)和臨床病理分級(jí)分期密切相關(guān)(P＜0.01)。③Bmi-1相對(duì)表達(dá)量在miRNA-200c高表達(dá)組中其表達(dá)量明顯低于mi