子癇前期患者胎盤組織中LIF和CD105的表達(dá)及其與血清中sCD105的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：妊娠期高血壓疾病(hypertensive disorders complicating pregnancy， HDCP)是妊娠20周后出現(xiàn)的人類特有的妊娠期并發(fā)癥。嚴(yán)重威害母嬰健康，主要臨床表現(xiàn)是高血壓和蛋白尿，嚴(yán)重的可出現(xiàn)昏迷、抽搐甚至死亡。雖然經(jīng)過幾十年的研究，子癇前期的病因和發(fā)病機(jī)制仍不清楚。胎盤或滋養(yǎng)細(xì)胞缺血缺氧學(xué)說是眾多病因?qū)W說之一，近年來得到大家的公認(rèn)。而滋養(yǎng)細(xì)胞侵潤能力下降造成滋養(yǎng)細(xì)胞侵入子宮壁過淺和螺旋動(dòng)脈重塑障

2、礙被認(rèn)為是子癇前期發(fā)病中的重要機(jī)制。很多臨床研究發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮生長因子、胎盤生長因子等表達(dá)水平、滋養(yǎng)細(xì)胞分化發(fā)育的異?？赡芘c胎盤淺著床相關(guān)，引發(fā)子癇前期。白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor， LIF)是一種分泌型糖蛋白，屬于白細(xì)胞介素6（IL-6）家族的成員。在胚胎的生長、發(fā)育及分化中起重要作用。正常妊娠時(shí)發(fā)生的生理性滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤引起血管重鑄，對(duì)正常妊娠的維持起重要作用，LIF通過多種途徑影響滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤

3、能力，有利于妊娠維持。此外LIF還控制胎盤絨毛血管生成，是強(qiáng)有力的血管生成調(diào)節(jié)因子，對(duì)胎盤生長發(fā)育也十分重要。一旦LIF分泌或調(diào)控異?？赡軐?dǎo)致病理妊娠。CD105又名Endoglin，是主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的糖蛋白，在有血管生成的組織，如愈合的傷口、胚胎組織及腫瘤組織的內(nèi)皮細(xì)胞中特異性高表達(dá)，是血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的相關(guān)標(biāo)志物。研究表明，CD105是血管新生必需的，其過度表達(dá)可能抑制血管新生，損害血管內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)致子癇前期的發(fā)生。本課題擬

4、通過分析子癇前期患者與正常晚孕婦女胎盤組織及母體血清中CD105及白血病抑制因子(LIF)的表達(dá)，分析其與妊娠高血壓疾病的相關(guān)性及相互間的關(guān)系，從而進(jìn)一步探討其在妊娠高血壓疾病發(fā)病中的作用，并為臨床治療提供實(shí)驗(yàn)性理論依據(jù)。
　　 方法：選擇2009年7月份至2010年10月份在河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院住院分娩的子癇前期患者45例，其中輕度子癇前期患者25例，重度子癇前期患者20例，選擇臨產(chǎn)前行剖宮產(chǎn)術(shù)的晚孕期正常組孕婦40例為對(duì)照組

5、，所有孕婦均無產(chǎn)科其他并發(fā)癥及合并癥。三組孕婦在入院治療前及產(chǎn)后第5天均于清晨空腹抽取肘靜脈血3ml，采集后立即離心(800-1000r/min)5分鐘，取上清，-70℃冰箱保存?zhèn)溆?。剖宮產(chǎn)孕婦分娩后立即取臍帶附近處胎盤母面絨毛組織塊約1cm×1cm×1cm，避開鈣化區(qū)及壞死區(qū)，留取胎盤組織，10％福爾馬林液固定24小時(shí)以上，常規(guī)石蠟包埋5um連續(xù)切片。免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)胎盤組織中的CD105及LIF的表達(dá)情況。所有統(tǒng)計(jì)學(xué)處理均應(yīng)用S

6、PSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。應(yīng)用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料用x±s表示，兩樣本均數(shù)比較用LSD-t檢驗(yàn)，兩者間的相關(guān)性分析用pearson相關(guān)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.臨床一般資料比較：各組間年齡、孕周、產(chǎn)次的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.LIF在各組胎盤組織中的表達(dá)：LIF在三組孕婦胎盤組織中均呈陽性表達(dá)，且陽性染色均呈棕色、褐色，主要定位于胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞漿及細(xì)

7、胞膜中，其次定位于絨毛間質(zhì)細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞，而細(xì)胞核無明顯著色(見圖1-3)。LIF在對(duì)照組的表達(dá)水平為174.32±41.20，輕度子癇前期組為104.66±35.09，重度子癇前期組89.11±30.19，對(duì)照組與輕度、重度子癇前期組比較，LIF在胎盤組織的表達(dá)明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；而輕度子癇前期組與重度子癇前期組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)果提示子癇前期患者胎盤組織中LIF的表達(dá)明顯降低。

8、>　　 3.CD105在各組胎盤組織中的表達(dá)：CD105陽性表達(dá)主要分布在血管內(nèi)皮細(xì)胞和胎盤的合體滋養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞膜上(見圖4-6)，CD105在對(duì)照組的表達(dá)水平為0.176±0.065，輕度子癇前期組為0.277±0.057，重度子癇前期組0.382±0.047，輕度子癇前期組CD105表達(dá)較對(duì)照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，在重度子癇前期組較輕度子癇前期組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。結(jié)果提示隨著病情的

9、進(jìn)展，CD105在胎盤組織中的表達(dá)增加。
　　 4.分娩前sCD105各組血清中的表達(dá)：對(duì)照組為(1.220±0.403)ng/ml，輕度子癇前期組sCD105水平為(3.850±0.520)ng/ml，重度子癇前期組sCD105水平為(5.212±1.035)ng/ml，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，結(jié)果提示隨著病情的進(jìn)展，sCD105明顯增高。
　　 5.分娩前后sCD105在各組血清中的表達(dá)：對(duì)照組分娩

10、后sCD105為(1.020±0.303)ng/ml，輕度子癇前期組sCD105水平為(1.650±0.470)ng/ml，重度子癇前期組sCD105水平為(2.038±1.010)ng/ml，對(duì)照組血清中sCD105分娩前后無明顯改變，輕度子癇前期和重度子癇前期組分娩后明顯低于分娩前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。結(jié)果提示隨著病情的緩解，分娩前的高sCD105水平隨之下降。
　　 6.對(duì)照組CD105與分娩前sCD105的

11、表達(dá)呈正相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)r=0.64，P＜0.01；子癇前期組CD105與sCD105的表達(dá)呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.86，P＜0.01；結(jié)果提示胎盤組織中CD105的升高影響著血清中sCD105的含量。
　　 7.對(duì)照組LIF與CD105的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=-0.77，P＜0.01；子癇前期組LIF與CD105的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=-0.79，P＜0.01；結(jié)果提示在子癇前期患者隨著LIF的下降，CD105的表達(dá)

12、升高。
　　 8.對(duì)照組LIF與分娩前sCD105的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=-0.85，P＜0.01；子癇前期組LIF與分娩前sCD105的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=-0.91，P＜0.01；結(jié)果提示子癇前期時(shí)LIF表達(dá)的下降，血清中sCD105表達(dá)升高。
　　 結(jié)論
　　 1．子癇前期患者胎盤組織中LIF表達(dá)減弱，而CD105表達(dá)增強(qiáng)，兩者呈負(fù)相關(guān)，共同參與了子癇前期的病理生理過程。
　　 2．子癇前