蛋黃蛋白質(zhì)酶解制備降血壓肽的研究.pdf

1、高血壓是一種慢性的心腦血管疾病，是冠心病、腦卒中等心腦血管疾病的主要危險(xiǎn)因素。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界每年因高血壓引起的心腦血管疾病的死亡人數(shù)超過(guò)260萬(wàn)，高血壓病已成為全球性的重大的公共衛(wèi)生問(wèn)題。 降血壓肽是一種具有生物活性的肽，它通過(guò)抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)活性而達(dá)到降血壓的作用。可廣泛地應(yīng)用于現(xiàn)代食品、保健品、醫(yī)藥等各領(lǐng)域。食物蛋白來(lái)源的降血壓肽無(wú)毒、無(wú)副作用，采用酶解方法水解過(guò)程易于控制，價(jià)廉易于推廣。本文通過(guò)篩選出蛋黃蛋白

2、質(zhì)制備降血壓肽的蛋白酶，系統(tǒng)地研究了酶反應(yīng)條件對(duì)降血壓肽制備的影響，并給出了各自適宜的反應(yīng)條件。 產(chǎn)物體外活性檢測(cè)方法采用高效液相色譜分析，檢測(cè)條件為：柱HypersilC184.0*250nm，5μm；檢測(cè)波長(zhǎng)228nm；柱溫30℃；流動(dòng)相MeOH∶H2O=15∶85(含0.1％THF)；流速1.0mL/min，體系中馬尿酸與其它物質(zhì)能夠進(jìn)行很好地分離。 采用酶法制備降血壓肽，以不同種類蛋白酶對(duì)用不同方法處理的原料蛋白

3、質(zhì)進(jìn)行酶解，結(jié)果均顯示堿性蛋白酶的水解產(chǎn)物對(duì)ACE的抑制活性最高。超臨界萃取蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物抑制率高達(dá)72.81％，且蛋白質(zhì)回收率為78％，選擇具有對(duì)ACE體外抑制活性最高的堿性蛋白酶作為制備蛋黃降血壓肽的最佳用酶。 實(shí)驗(yàn)中考察了水解時(shí)間、溫度、pH值、底物濃度及加酶量變化時(shí)水解度隨時(shí)間的變化情況，得到蛋黃蛋白質(zhì)酶解作用的最適水解時(shí)間為300min、溫度為45℃、pH為9.5、底物濃度為6.3％、加酶量為7％。在此條件下，蛋黃蛋白