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文檔簡介
1、銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是一種革蘭氏陰性致病菌,在自然界中分布廣泛并且致病率很高,是引起院內(nèi)感染的三大病原菌之一。隨著抗生素藥物的廣泛使用,銅綠假單胞菌多重耐藥菌株和耐藥率不斷上升,多種抗生素失去其療效,使得臨床的抗感染治療越來越困難。研究銅綠假單胞菌中的耐藥基因及耐藥機(jī)理對于控制銅綠假單胞菌感染具有重要的意義。在實驗室的前期研究中,通過對銅綠假單胞菌轉(zhuǎn)座突變體文庫進(jìn)行藥物敏感性篩選,發(fā)現(xiàn)基因PA28
2、00突變體對四環(huán)素和環(huán)丙沙星敏感性升高。
本文對PA2800基因進(jìn)行了進(jìn)一步深入研究。首先通過基因敲除的手段構(gòu)建PA2800的基因敲除突變體,并與野生型銅綠假單胞菌比較,測定了其在固體和液體LB中抗生素抗性的變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在固體和液體LB中PA2800突變體對四環(huán)素、環(huán)丙沙星和氯霉素敏感性都升高,證實PA2800基因與銅綠假單胞菌耐藥性相關(guān)。研究抗生素對這一基因的調(diào)節(jié)發(fā)現(xiàn),低于抑制濃度的四環(huán)素和紅霉素對PA2800的表達(dá)具
3、有激活作用,暗示這一基因有可能在抗生素存在下誘導(dǎo)銅綠假單胞菌產(chǎn)生抗性。同時,致病力比較研究發(fā)現(xiàn)PA2800和銅綠假單胞菌致病有關(guān),用野生型PAO和PA2800突變體感染果蠅,突變體對果蠅的致死率更高。相關(guān)毒性因子在突變體和野生型中的表達(dá)測定表明,rhlR和znuA在PA2800突變體中的表達(dá)增強(qiáng),這可能是導(dǎo)致突變體較野生型致死率高的因素。同時,我們還發(fā)現(xiàn)oprH在PA2800突變體中的表達(dá)增強(qiáng)。OprH是一個外膜孔蛋白,它的過量表達(dá)可以
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