生精散治療大鼠弱精子癥的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)擬從兩個(gè)方面來(lái)研究生精散對(duì)弱精子癥的療效及其治療機(jī)理,旨在獲得科學(xué)規(guī)范的臨床資料,并闡明生精散的作用機(jī)制,為生精散治療弱精子癥不育提供科學(xué)的理論依據(jù),以期弘揚(yáng)祖國(guó)醫(yī)學(xué)之精髓。本實(shí)驗(yàn)對(duì)于深入研究精子特異性鈣通道蛋白CatSper在弱精子癥發(fā)生中的作用,進(jìn)而闡明弱精子癥的發(fā)病機(jī)制,尋找新的臨床治療靶點(diǎn)也具有重要的價(jià)值。
　　方法:本實(shí)驗(yàn)采用喂服GTW的方法誘導(dǎo)大鼠弱精子癥的發(fā)生,采用睪丸組織病理學(xué)檢測(cè)(H.E染色)、精液常

2、規(guī)分析和精子活力檢測(cè)的方法,檢測(cè)大鼠精子的形態(tài)與活力,建立弱精子癥大鼠模型,同時(shí)采用Real-timePCR(mRNA水平檢測(cè))與免疫組化的方法,觀察四種CatSper通道蛋白(CatSper1-4)在模型大鼠精子質(zhì)膜上的表達(dá)的變化,試圖闡明以下問(wèn)題:1.四種CatSper通道蛋白(CatSper1-4)在模型大鼠精子質(zhì)膜上的表達(dá)是否較對(duì)照組減少;2.生精散是否可以通過(guò)提高模型大鼠精子質(zhì)膜CatSper的表達(dá)、增強(qiáng)該通道的功能來(lái)提高精子

3、的活力。
　　結(jié)果:1.大鼠弱精子癥模型的建立采用喂服GTW的方法誘導(dǎo)大鼠弱精子癥的發(fā)生,采用睪丸組織病理學(xué)檢測(cè)(H.E染色)、精液常規(guī)分析和精子活力檢測(cè)的方法,檢測(cè)大鼠精子的形態(tài)與活力。結(jié)果表明:GTW組大鼠精子的活率、活力、密度以及直線運(yùn)動(dòng)速度(VSL)、平均路徑速度(VAP)和曲線運(yùn)動(dòng)速度(VCL)等功能指標(biāo)均較正常對(duì)照組和NS組顯著降低。睪丸組織H.E染色顯示,模型組大鼠生精小管內(nèi)各級(jí)精母細(xì)胞和精子細(xì)胞數(shù)明顯減少,生精細(xì)胞

4、排列紊亂,表明GTW可以誘導(dǎo)穩(wěn)定的弱精子癥大鼠模型。2.弱精子癥大鼠是否有精子特異性鈣通道蛋白CatSper的表達(dá)減少通過(guò)免疫組織化學(xué)、Real-timePCR方法分別觀察(CatSper1-4)在模型大鼠精子質(zhì)膜上的表達(dá)是否較對(duì)照組減少。結(jié)果表明:模型組大鼠catsper蛋白表達(dá)明顯較對(duì)照組減少。為進(jìn)一步研究弱精子癥的發(fā)生提供了基礎(chǔ)。3.生精散具有提高精子的密度、活力、活率及運(yùn)動(dòng)速度的作用。通過(guò)采用計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)(comput

5、erassistedspermanalysis,CASA)檢測(cè)精子的密度、活力、活率、及運(yùn)動(dòng)速度等各項(xiàng)功能指標(biāo)。結(jié)果:生精散可以明顯提高模型組精子的密度、活力、活率及運(yùn)動(dòng)速度,從而治療大鼠弱精子癥。
　　結(jié)論:1.GTW組大鼠精子的活率、活力、密度以及直線運(yùn)動(dòng)速度(VSL)、平均路徑速度(VAP)和曲線運(yùn)動(dòng)速度(VCL)等功能指標(biāo)均較正常對(duì)照組和NS組顯著降低。睪丸組織H.E染色顯示,模型組大鼠生精小管內(nèi)各級(jí)精母細(xì)胞和精子細(xì)胞數(shù)明