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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察四種抗骨質(zhì)疏松治療藥物(維生素K2、PTH、活性維生素D3、阿倫膦酸鹽)對(duì)人血管平滑肌細(xì)胞及人MG-63細(xì)胞基質(zhì)Gla蛋白,探討MGP在骨質(zhì)疏松發(fā)病中的可能作用及骨質(zhì)疏松治療藥物對(duì)預(yù)防動(dòng)脈硬化的可能作用。
方法:⑴選取人血管平滑肌細(xì)胞及經(jīng)典的具有成骨細(xì)胞表型特征的成骨細(xì)胞模型人成骨肉瘤MG63細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)。⑵分別給予不同濃度的維生素K2、PTH、活性維生素D3、阿倫膦酸鹽干預(yù)培養(yǎng)24h:維生素K2(10-7、10
2、-6、10-5mol/L),活性維生素D3(10-10、10-9、10-8mol/L),PTH(10-9、10-8、10-7mol/L),阿倫膦酸鹽(10-6、10-5、10-4mol/L),每種藥物均設(shè)立空白對(duì)照。⑶培養(yǎng)24h后抽提血管平滑肌細(xì)胞及MG-63細(xì)胞總蛋白,采用Western-Blot方法檢測(cè)血管平滑肌細(xì)胞及MG-63細(xì)胞中基質(zhì)Gla蛋白表達(dá)的變化。
結(jié)果:①維生素K2、活性維生素D3、PTH、阿倫膦酸鹽對(duì)人血管
3、平滑肌細(xì)胞基質(zhì)Gla蛋白表達(dá)的影響:維生素K2、活性維生素D3、PTH、阿倫膦酸鹽均可上調(diào)人血管平滑肌細(xì)胞基質(zhì)Gla蛋白的表達(dá),并且隨著藥物濃度呈梯度增高,MGP蛋白的表達(dá)亦明顯增高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。②維生素K2、PTH、活性維生素D3、阿倫膦酸鹽對(duì)人成骨肉瘤MG-63細(xì)胞基質(zhì)Gla蛋白表達(dá)的影響:維生素K2、活性維生素D3、PTH、阿倫膦酸鹽均可上調(diào)人成骨肉瘤MG-63細(xì)胞基質(zhì)Gla蛋白的表達(dá),并且隨著藥物濃度呈梯
4、度增高,MGP蛋白的表達(dá)亦明顯增高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:Western-Blot技術(shù)證實(shí)骨質(zhì)疏松藥物可影響人血管平滑肌細(xì)胞中MGP的表達(dá),同時(shí)證實(shí)MGP在人成骨肉瘤MG-63細(xì)胞中有表達(dá)。骨質(zhì)疏松治療藥物維生素K2、PTH、活性維生素D3、阿倫膦酸鹽均可促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞和MG-63細(xì)胞基質(zhì)Gla蛋白的表達(dá),且呈劑量依賴性。骨質(zhì)疏松治療藥物可能成為動(dòng)脈硬化預(yù)防和治療的新研究方向,同時(shí)MGP可能成為骨質(zhì)疏
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