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文檔簡介
1、硫代葡萄糖苷(簡稱硫苷)是廣泛存在于十字花科植物中的含硫次級(jí)化合物。近年來大量研究表明硫代葡萄糖苷的降解產(chǎn)物異硫代氰酸酯具有抗癌活性,因此對(duì)其進(jìn)行分離純化具有重大的意義。由于硫代葡萄糖苷類化合物在結(jié)構(gòu)上的相似性,使得該類化合物的分離純化困難。低速逆流色譜技術(shù)(SRCCC)是近年來發(fā)展起來的一種新型逆流色譜技術(shù)。目前針對(duì)其分離的研究報(bào)道還較少。本論文基于低速逆流色譜技術(shù)對(duì)蘿卜籽中的硫代葡萄糖苷進(jìn)行制備型分離,為硫代葡萄糖苷的工業(yè)化生產(chǎn)打下
2、基礎(chǔ)。 采用甲醇沸騰提取法,通過滅酶、粉碎、浸提、萃取、濃縮干燥等操作,從30kg蘿卜籽中得到硫代葡萄糖苷粗提物3380.8g。 采用SRCCC-D1000型低速逆流色譜儀對(duì)蘿卜籽中硫代葡萄糖苷的分離進(jìn)行了初探。對(duì)溶劑系統(tǒng)進(jìn)行了研究,找到了合適的溶劑系統(tǒng):正丁醇-乙腈-10%硫酸銨溶液(0.5:1:2.2)。探討了流動(dòng)相流速、色譜柱轉(zhuǎn)速、進(jìn)樣量等參數(shù)對(duì)固定相保留率的影響,優(yōu)化了分離條件,確定了低速逆流色譜的分離條件:流動(dòng)
3、相流速3 mL/min、色譜柱轉(zhuǎn)速50 rpm、進(jìn)樣量1.5 g。采用柱容量為1000 mL的SRCCC-D1000型低速逆流色譜儀分離蘿卜籽粗提物,除鹽和色素后得到化合物I為67.6 mg,此外其它部分經(jīng)制備高效液相色譜進(jìn)一步純化得到化合物Ⅱ?yàn)?.3 mg和組分Ⅲ為10.4 mg。采用ESI-MS和NMR對(duì)分離得到的物質(zhì)進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定,化合物Ⅰ為4-甲基亞磺酰基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷,化合物Ⅱ?yàn)楸┗虼咸烟擒?組分Ⅲ為非硫苷物質(zhì)
4、。 采用浙江工商大學(xué)食品與生物工程研究所自行研制的具有世界先進(jìn)水平的SRCCC-D30L型低速逆流色譜儀對(duì)蘿卜籽中硫代葡萄糖苷進(jìn)行了大規(guī)模的制備分離研究。在柱容積為7L、17L、30L的條件下,依次成功的對(duì)蘿卜籽中的硫代葡萄糖苷進(jìn)行了從數(shù)十克級(jí)到數(shù)百克級(jí)的制備型分離,結(jié)果表明分離效率隨著柱容量的不斷增大而增大。采用兩臺(tái)SRCCC-D30L型低速逆流色譜儀以雙機(jī)串聯(lián)的方式使其柱容量達(dá)到60L,成功的對(duì)蘿卜籽中的硫代葡萄糖苷進(jìn)行了千
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