逆流色譜法分離油菜籽中的硫代葡萄糖苷.pdf

1、硫代葡萄糖苷(簡稱硫苷)是廣泛存在于十字花科植物中的含硫次生代謝產(chǎn)物。此類化合物及其降解產(chǎn)物具有廣泛的生物活性，不僅可以抑致細(xì)菌和微生物的生長，還具有很好的抗癌活性。因此，對(duì)硫苷的分離提純及其結(jié)構(gòu)鑒定在食品科學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等方面有著重要的實(shí)踐意義。逆流色譜是一種不用固態(tài)支撐體或載體的液液分配色譜技術(shù)，它可以實(shí)現(xiàn)連續(xù)高效的分離和制備。本論文應(yīng)用逆流色譜技術(shù)分離油菜籽中的硫代葡萄糖苷，為硫代葡萄糖苷的分離制備打下技術(shù)基礎(chǔ)。 本研究對(duì)逆

2、流色譜分離油菜籽中的硫代葡萄糖苷的溶劑系統(tǒng)進(jìn)行了研究，找到了合適的溶劑系統(tǒng)正丁醇-乙腈-10％硫酸銨溶液(1：0.5：2.2)。采用柱容積200 ml的HSCCC-D200型高速逆流色譜儀分離400mg油菜籽粗提物，得到13.6mg A2組分(主要為烯丁基硫苷，下同)和47.2mg B組分(主要為2-羥基-3-烯丁基硫苷，下同)，分離時(shí)間8.5小時(shí)。采用柱容積3400 ml的SRCCC-D3400型低速逆流色譜儀分離7g油菜籽粗提物，得

3、到86.3mg A2組分和521.4mg B組分，分離時(shí)間22個(gè)小時(shí)。本實(shí)驗(yàn)還研究了流動(dòng)相流速、色譜柱轉(zhuǎn)速、進(jìn)樣量等參數(shù)對(duì)固定相的保留率及分離效果的影響，優(yōu)化了分離條件。逆流色譜分離獲得的硫代葡萄糖苷組分，經(jīng)制備高效液相色譜等進(jìn)一步純化得到三種硫代葡萄糖苷單體：(1)E-(N)-烯丁基硫苷(2)Z-(N)-烯丁基硫苷(3)2-羥基-3-烯丁基硫苷。它們的結(jié)構(gòu)經(jīng)ESI-MS和<'1>HNMR、<'13>CNMR進(jìn)行了鑒定。應(yīng)用柱容積120