PLGA-HA支架與納米銀復(fù)合物結(jié)合CAD-CAM技術(shù)修復(fù)氣管軟骨缺損的研究.pdf

1、目的：通過應(yīng)用聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)、羥基磷灰石(HA)、納米銀為材料，制作多孔人工材料，用于修復(fù)犬的氣管軟骨缺損，以評(píng)估該氣管重建材料對(duì)聲門下氣管缺損的治療的有效性。
　　方法：⑴利用256層CT對(duì)實(shí)驗(yàn)犬的喉部進(jìn)行掃描，重建出氣管軟骨的大致形態(tài)，了解犬氣管軟骨的大致直徑及軟骨厚度，應(yīng)用CAD軟件設(shè)計(jì)模具，將凹凸模具以.STL格式導(dǎo)出，應(yīng)用快速成型(RP)技術(shù)制造模具。使用羥基磷灰石(HA)、聚乳酸-羥基乙酸共聚物(P

2、LGA)為修復(fù)喉氣管軟骨缺損的材料，應(yīng)用冷凍干燥法注模制備人工材料支架。⑵使用冷凍干燥法制備不同組分的（HA組、PLGA/HA組、PLGA/HA+納米銀組）的標(biāo)準(zhǔn)樣件(0.4×0.4×0.3cm)。取大鼠喉氣管軟骨片段，Ⅱ型膠原酶消化，傳代培養(yǎng)獲得軟骨細(xì)胞。將傳至第3代的軟骨細(xì)胞種植于96孔板內(nèi)三組不同的標(biāo)準(zhǔn)樣件上，分別于1、3、5、7天取出，用噻唑藍(lán)(MTT)法測(cè)定軟骨細(xì)胞的增殖活性。⑶選取10只實(shí)驗(yàn)犬（雜種犬，體重10-15kg），

3、預(yù)實(shí)驗(yàn)1只作為空白對(duì)照組，剩余隨機(jī)分為3組，按預(yù)制的人工氣管支架形狀切除3個(gè)氣管軟骨環(huán)形成缺損區(qū)，將人工材料代替切除的氣管組織縫合至氣管上。A組為缺損區(qū)植入HA支架，B組為缺損區(qū)植入PLGA/HA支架，C組為缺損區(qū)植入PLGA/HA+納米銀支架。術(shù)后對(duì)實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行大體觀察，分別于術(shù)后1周、4周、8周處死，處死前對(duì)實(shí)驗(yàn)犬行電子喉鏡檢測(cè)，處死后取出犬重建的氣管軟骨及周圍組織。
　　結(jié)果：①M(fèi)TT法示PLGA/HA組、PLGA/HA+納米

4、銀組軟骨細(xì)胞增殖速度明顯高于HA組，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明PLGA/HA復(fù)合材料較單純的HA材料更有利于軟骨細(xì)胞的增殖。②空白對(duì)照組術(shù)后切口愈合差，切口紅腫，術(shù)后8周行電子喉鏡見缺損處肉芽生長，缺損處管腔Ⅰ°狹窄。術(shù)后8周組織切片可見缺損區(qū)大量纖維結(jié)締組織增生，且失去氣管軟骨原有形態(tài)。A組實(shí)驗(yàn)犬術(shù)后切口出現(xiàn)紅腫、皮下積膿，術(shù)后4周、8周行電子喉鏡見手術(shù)缺損區(qū)管腔Ⅰ°狹窄，見肉芽組織生成。術(shù)后8周行組織切片見手術(shù)缺損區(qū)少量成

5、熟軟骨組織，炎性反應(yīng)明顯，大量纖維結(jié)締組織增生。B組實(shí)驗(yàn)犬術(shù)后切口出現(xiàn)紅腫、皮下積膿，術(shù)后1周、4周、8周行電子喉鏡見少許肉芽生長，無管腔塌陷現(xiàn)象發(fā)生。術(shù)后8周組織切片可見缺損區(qū)域大量成熟軟骨組織及纖維結(jié)締組織，炎性反應(yīng)不明顯。C組實(shí)驗(yàn)犬術(shù)后切口甲級(jí)愈合，行電子喉鏡見氣管內(nèi)黏膜未見炎癥，無肉芽生長，氣管管腔通暢。術(shù)后8周組織切片見有明顯新生軟骨生成，與正常軟骨相比組織學(xué)形態(tài)無差異，被覆上皮相同。
　　結(jié)論：⑴結(jié)合CAD建模及RP技