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文檔簡介
1、目的:建立大鼠圍產(chǎn)期鐵缺乏模型并觀察其一般狀況,檢測大鼠圍產(chǎn)期血液學(xué)參數(shù):血紅蛋白(Hb)、紅細胞計數(shù)(RBC)、紅細胞平均體積(MCV)、血細胞比容(PCV或HCT)、紅細胞平均血紅蛋白含量(MCH)、紅細胞體積分布寬度(RDW),鐵蛋白(Fn),促紅細胞生成素(EPO)和胰島素樣生長因子-1(IGF-1),同時檢測大鼠圍產(chǎn)期內(nèi)分泌腺體激素分泌水平,觀察其子代是否出現(xiàn)低出生體重現(xiàn)象;探討新生鼠內(nèi)分泌腺體和肝組織促紅細胞生成素受體(EP
2、OR)表達情況以及新生鼠肝臟組織EPO和IGF-1濃度是否受親代鐵缺乏的影響;初步完成下丘腦、垂體、腎上腺體外培養(yǎng)嘗試,為后期下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA)分泌功能的研究做鋪墊。
方法:選擇健康Wistar雌鼠32只,適應(yīng)性飼喂1周后,隨機分為實驗組和對照組,實驗組用含鐵元素10.0mg/Kg的低鐵飼料飼養(yǎng),對照組以含鐵元素216.0mg/Kg的對照組飼料飼養(yǎng),其他條件均相同,開始干預(yù)。干預(yù)4周后再與健康雄鼠同籠交配,雌鼠孕
3、期繼續(xù)低鐵飼料干預(yù)直至分娩,在圍產(chǎn)期檢測孕鼠的Fn、EPO、IGF-1和血液學(xué)指標,同時檢測內(nèi)分泌腺體分泌的相關(guān)激素。子代出生后,觀察新生鼠出生情況并稱其出生體重。取新生鼠的丘腦、垂體和腎上腺及肝臟組織等,將這些組織制成組織切片,觀察其EPOR的表達情況,同時用肝組織制備組織勻漿檢測其EPO和IGF-1水平,另外對丘腦、垂體和腎上腺進行體外培養(yǎng)嘗試,利用人促紅細胞生成素刺激單一內(nèi)分泌腺體細胞,檢測內(nèi)分泌腺體分泌的相應(yīng)激素:生長激素(GH
4、)、生長激素釋放激素(GHRH)、促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、腎上腺素(EPI)及皮質(zhì)酮(CORT)等水平變化。
結(jié)果:①大鼠圍產(chǎn)期鐵缺乏模型成功建立。圍產(chǎn)期實驗鼠Hb、MCV、PCV、MCH、Fn、IGF-1、GH及CORT明顯低于對照組,兩組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);而RDW,血漿ACTH、GHRH、EPI,血漿和肝組織勻漿EPO水平均顯著增加,兩組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);②實驗組大鼠出現(xiàn)難
5、產(chǎn)現(xiàn)象,并且其新生鼠死胎率較對照組高;與對照組相比,實驗組新生鼠肝組織勻漿中IGF-1顯著降低(p<0.05);③實驗組新生鼠的垂體,腎上腺,肝臟都有EPOR表達,略高于對照組;④初步掌握下丘腦、垂體、腎上腺的體外培養(yǎng)技術(shù);⑤EPO刺激內(nèi)分泌腺體細胞,其激素分泌水平實驗組與對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。
結(jié)論:1.大鼠圍產(chǎn)期鐵缺乏模型成功建立。
2.大鼠圍產(chǎn)期鐵缺乏使親代Fn、EPO、GH、IGF-1、GH
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