不同運(yùn)動(dòng)應(yīng)激狀態(tài)下丘腦-垂體-腎上腺軸應(yīng)激反應(yīng)機(jī)制研究.pdf

1、研究目的：運(yùn)動(dòng)應(yīng)激是運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練與運(yùn)動(dòng)健身產(chǎn)生效應(yīng)的生物學(xué)基礎(chǔ)，但是運(yùn)動(dòng)應(yīng)激時(shí)的下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA)軸中樞反應(yīng)機(jī)制研究較少，尤其對(duì)于不同運(yùn)動(dòng)應(yīng)激時(shí)一氧化氮(NO)通過糖皮質(zhì)激素受體(GR)與糖皮質(zhì)激素(GC)結(jié)合而影響HPA軸調(diào)節(jié)、以及GR、NOS的變化對(duì)HPA軸中樞調(diào)節(jié)系統(tǒng)研究未見報(bào)道。本研究以不同負(fù)荷跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)引起的應(yīng)激2態(tài)為研究對(duì)象，從HPA軸外周激素水平變化、中樞相關(guān)受體基因水平變化和蛋白表達(dá)變化等不同層次和角度，分析不同

2、負(fù)荷運(yùn)動(dòng)應(yīng)激的HPA軸的應(yīng)激程度及中樞調(diào)節(jié)規(guī)律，揭示不同運(yùn)動(dòng)負(fù)荷應(yīng)激時(shí)的中樞調(diào)節(jié)機(jī)制。
　　 研究方法：11周齡雄性SD大鼠130只，隨機(jī)分為長期運(yùn)動(dòng)組、一次運(yùn)動(dòng)組及對(duì)照組。長期運(yùn)動(dòng)組大鼠以高、中、低三種不同負(fù)荷進(jìn)行跑臺(tái)訓(xùn)練，6天/周，1小時(shí)/天，實(shí)驗(yàn)期8周；一次運(yùn)動(dòng)組亦采用三種不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)，采用長期訓(xùn)練組同等負(fù)荷末次運(yùn)動(dòng)方案。測(cè)試方法與指標(biāo)：雙抗體夾心酶標(biāo)免疫分析法測(cè)定血清CORT、T、ACTH、下丘腦CRH含量；免疫組化法測(cè)

3、海馬CA1區(qū)、下丘腦弓狀核、腹內(nèi)側(cè)核、背內(nèi)側(cè)核、室旁核、中央杏仁核進(jìn)行形態(tài)觀察，并測(cè)定GR、NOS等陽性神經(jīng)元數(shù)量變化；RT-PCR法測(cè)定海馬、下丘腦、杏仁核GR、MR、NOS基因轉(zhuǎn)錄水平，Westernblotting法測(cè)定上述核團(tuán)GR、NOS蛋白表達(dá)量。
　　 研究結(jié)果：(1)長期大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組海馬MR、GR轉(zhuǎn)錄減少、GR表達(dá)減少(P<0.05)，NOS轉(zhuǎn)錄及表達(dá)水平無明顯變化；下丘腦興奮提高，GR、MR轉(zhuǎn)錄水平降低，NOS表

4、達(dá)增多(P<0.05)；杏仁核GR基因轉(zhuǎn)錄水平無明顯變化，杏仁核NOS基因轉(zhuǎn)錄增多(P<0.05)；ACTH升高，CRH、CORT濃度降低。(2)長期中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組海馬GR、NOS基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)增多(P<0.01)，海馬興奮性降低；下丘腦興奮性提高，GR轉(zhuǎn)錄減少，蛋白濃度升高，NOS基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)增多(P<0.05)：杏仁核興奮性提高，GR、NOS基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)減少，各核團(tuán)MR基因轉(zhuǎn)錄減少；CRH、ACTH、CORT濃度升高(P<0.0

5、5)。(3)長期低負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組海馬興奮性無明顯變化，MR基因轉(zhuǎn)錄增多，GR轉(zhuǎn)錄水平降低，NOS基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)增多(P<0.05)；下丘腦興奮，NOS、GR基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)增多(P<0.05)；杏仁核NOS基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)減少，GR基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)無明顯變化，杏仁核及下丘腦MR基因轉(zhuǎn)錄減少，CRH、CORT濃度升高，ACTH無明顯變化。(4)一次大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組海馬NOS基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)增多，GR基因轉(zhuǎn)錄增多，MR基因轉(zhuǎn)錄減少，海馬興奮性降低；下丘腦興

6、奮性降低，NOS基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)增多，GR、MR基因轉(zhuǎn)錄減少，GR蛋白升高(P<0.05)；杏仁核興奮性降低，NOS、GR基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)減少，MR基因轉(zhuǎn)錄增多(P<0.05)；CRH、CORT濃度升高，ACTH濃度降低(P<0.05)。(5)一次中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組海馬NOS基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)增多，GR基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)水平降低，海馬興奮性無明顯變化；下丘腦室旁核興奮，NOS基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)增多，GR基因轉(zhuǎn)錄水平無變化，表達(dá)增多(P<0.05)；杏仁核G

7、R基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)增多，NOS基因轉(zhuǎn)錄減少，但NOS濃度升高，各核團(tuán)MR轉(zhuǎn)錄降低(P<0.05)；CRH、CORT濃度升高，ACTH濃度降低。(6)一次低負(fù)荷運(yùn)動(dòng)海馬興奮性無變化，NOS、GR基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)減少，MR基因轉(zhuǎn)錄無變化；下丘腦興奮性提高NOS基因轉(zhuǎn)錄無明顯變化，NOS表達(dá)增多，GR基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)增多；杏仁核興奮性提高，NOS基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)增多，GR基因轉(zhuǎn)錄無明顯變化，表達(dá)增多，杏仁核及下丘腦MR基因轉(zhuǎn)錄減少(P<0.05)；C

8、RH、CORT濃度升高，ACTH濃度降低(P<0.05)。
　　 研究結(jié)論：(1)長期大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)應(yīng)激后海馬、下丘腦及杏仁核興奮性降低，HPA軸抑制；一次大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)應(yīng)激造成下丘腦及杏仁核興奮性升高，HPA軸激活。(2)長期大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后海馬抑制是由于海馬興奮性損傷導(dǎo)致；一次大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后海馬抑制是由于外周高水平GC的負(fù)反饋調(diào)節(jié)。(3)運(yùn)動(dòng)應(yīng)激反應(yīng)中海馬的興奮性與NOS無相關(guān)性，即NOS僅參與海馬興奮性損傷，而不參與其興奮性調(diào)節(jié)。(4)

9、長期中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)與一次中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)應(yīng)激HPA軸主要不同在于ACTH變化，長期中等負(fù)荷ACTH升高由于杏仁核NOS參與對(duì)垂體的調(diào)節(jié)，一次中等負(fù)荷后ACTH下降主要受外周GC、下丘腦與杏仁核的GR負(fù)反饋調(diào)節(jié)所致。(5)小負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后海馬興奮性無明顯變化，杏仁核與下丘腦興奮性提高，長期小負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后杏仁核NOS參與垂體ACTH調(diào)節(jié)，而一次負(fù)荷ACTH下降則受GC與海馬GR的反饋調(diào)節(jié)。(6)長期運(yùn)動(dòng)HPA軸的應(yīng)激反應(yīng)中樞調(diào)節(jié)多于外周調(diào)節(jié)；一次運(yùn)動(dòng)主