酶法制備高含量二亞油酰磷脂酰膽堿的研究.pdf

1、磷脂酰膽堿(PC)是人體細(xì)胞膜的基本構(gòu)成成分，對(duì)于維持生物膜的生理活性和機(jī)體的正常代謝起關(guān)鍵作用。二亞油酰磷脂酰膽堿(DLPC)作為其中的主要活性成分，在生物化學(xué)和細(xì)胞生理學(xué)方面都具有十分重要的意義。它具有促進(jìn)肝細(xì)胞的再生、減輕肝細(xì)胞脂肪變性和壞死、改善血液和肝臟的脂質(zhì)代謝以及防治肝硬化和肝纖維化等功能，從而保護(hù)肝細(xì)胞免受損害。
　　 為了提高大豆PC中DLPC含量，本研究以固定化脂肪酶Lipozyme TL IM為工具酶，于正

2、庚烷體系中催化大豆PC與亞油酸(LA)酸解反應(yīng)。首先，實(shí)驗(yàn)對(duì)脂肪酶及其反應(yīng)介質(zhì)作出篩選，最終確定正庚烷體系下脂肪酶Lipozyme TL IM催化酸解反應(yīng)。然后以產(chǎn)品LA含量作為考察指標(biāo)，探討PC濃度(PC/正庚烷，g/mL)、底物比(LA/PC，g/g)、酶添加量(以底物總質(zhì)量為基準(zhǔn)，％)、水分添加量(以溶劑體積為基準(zhǔn)，μL/mL)、反應(yīng)時(shí)間(h)、反應(yīng)溫度(℃)對(duì)酸解反應(yīng)的影響，并結(jié)合Plackett-Burman設(shè)計(jì)法對(duì)這六個(gè)因素

3、進(jìn)行研究，篩選出底物比、反應(yīng)溫度和酶添加量為主要的影響因子。在此基礎(chǔ)之上，通過響應(yīng)曲面法對(duì)底物比、反應(yīng)溫度和酶添加量的最佳水平及其交互作用作進(jìn)一步考察以優(yōu)化反應(yīng)條件。通過逐步回歸分析建立二次多項(xiàng)式模型，利用方差分析對(duì)該模型進(jìn)行了顯著性檢驗(yàn)，最終獲得的最佳反應(yīng)條件為：PC濃度，0.25g/mL；底物比,2.81；酶添加量,23.92％；反應(yīng)溫度，61.57℃；反應(yīng)時(shí)間,48h；水分添加量,3μL/mL，該條件下得到的產(chǎn)品經(jīng)GC檢測(cè)得其LA