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文檔簡介
1、本文旨在研究以生物法生產(chǎn)低聚葡萄糖,為低聚葡萄糖的工業(yè)化提供新的技術(shù)依據(jù)。 首先研究了腸膜明串珠菌(Leuconostocmesenteroides)發(fā)酵產(chǎn)葡聚糖。文中依據(jù)腸膜明串珠菌的生長曲線和搖瓶發(fā)酵曲線,確定了腸膜明串珠菌對(duì)數(shù)生長期為26~36h,穩(wěn)定期為36~60h;26h之后發(fā)酵液中開始產(chǎn)生葡聚糖。通過搖床發(fā)酵實(shí)驗(yàn)確定了發(fā)酵液最佳配方:蔗糖100g/L、蛋白胨5.0g/L、CaCO30.8g/L、MgSO40.02g/
2、L、(NH4)2SO40.02g/L;搖床發(fā)酵最佳條件:溫度25℃、活化液接種量5%、發(fā)酵液裝液量100/250mL、搖床轉(zhuǎn)速150r/min、發(fā)酵液起始pH值7.5。在此條件下,搖瓶和發(fā)酵罐發(fā)酵的蔗糖轉(zhuǎn)化率分別為62.58%和70.25%。 第二研究了發(fā)酵液的脫蛋白、脫色及葡聚糖的提取和沉淀工藝。研究發(fā)現(xiàn)TCA法脫蛋白效果最好,以0.1%TCA脫蛋白,蛋白的脫除率為81.5%,葡聚糖的損失率為10.2%;活性炭對(duì)發(fā)酵液的脫色效
3、果較好,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:10g/L活性炭用于脫色發(fā)酵液時(shí),脫色率為80.19%,葡聚糖損失率為19.24%;接著研究了NaCl、KCl、NaOH對(duì)葡聚糖提取的效果,結(jié)果表明:0.6mol/L的KCl,60℃提取效果最好,葡聚糖得率為43.57g/kg;最后考查了乙醇沉淀葡聚糖的效果,結(jié)果表明:60℃時(shí),60%乙醇終濃度沉淀葡聚糖效果較好,葡聚糖得率為41.28g/kg; 第三研究了普魯蘭酶(OptimaxEC3.2.1.41)酶解
4、葡聚糖生產(chǎn)低聚葡萄糖。通過酶解實(shí)驗(yàn)確定酶解葡聚糖的最優(yōu)條件為:pH4.4、溫度54℃、反應(yīng)時(shí)間0.5h、酶活濃度2000ASPU/g,在此條件下,94.11%的葡聚糖可以降解為低分子量的糖。 最后探討了低聚葡萄糖的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。高效液相色譜表明酶解產(chǎn)物中低聚葡萄糖占74.55%,比市面上銷售的低聚異麥芽糖IM0500的活性成分高。紅外光譜表明低聚葡萄糖含有α吡喃糖苷鍵。通過葡聚糖相對(duì)粘度的測定,發(fā)現(xiàn)低聚葡萄糖的粘度隨著溫度的增加而
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