乏氧對骨肉瘤細胞株Saos2多藥耐藥性的影響.pdf

1、目的:檢測乏氧情況下骨肉瘤細胞株Saos2對ADM和DDP的敏感性改變，分析其與多藥耐藥相關(guān)基因MDR1、GST-π、LRP(肺耐藥蛋白)和MRP(多藥耐藥相關(guān)蛋白)表達的關(guān)系，同時檢測其細胞周期的改變，探討骨肉瘤化療耐藥的機理，為臨床上預(yù)測腫瘤耐藥程度、判斷療效和合理選擇化療方案提供依據(jù)和指導(dǎo)。 方法:乏氧條件下(0.2％O2)人骨肉瘤細胞株Saos2體外培養(yǎng)24小時，75％酒精固定后應(yīng)用MTT法測定細胞株化療藥物敏感性；應(yīng)用

2、熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR)檢測MDR1mRNA和GST-πmRNA表達水平；MDR1、GST-π、LRP和MRP蛋白水平的表達及細胞周期的改變采用流式細胞術(shù)(FCM)進行。 結(jié)果:乏氧后Saos2細胞對阿霉素(ADM)、順鉑(DDP)的敏感性均低于常氧對照，耐藥相關(guān)基因的表達高于常氧對照，其GST-π表達較常氧對照增加15％。細胞株經(jīng)1/5半數(shù)抑制濃度(IC50)的ADM和DDP處理后，乏氧組和常氧組耐藥相關(guān)基因

3、表達均有所上調(diào)，其中GST-π增幅達30％～40％。 FCM檢測腫瘤組織P-gp、LRP、MRP的表達處于較低水平，GST-π表達處于較高水平。X2分析顯示，P-gp表達水平與ADM的耐藥有關(guān)(X2=9.554，P=0.008)，GST-π表達水平與ADM、DDP的耐藥有關(guān)(X2分別為6.051、8.015，P值分別為0.049、0.013)。 患者耐藥基因GST-π表達在mRNA水平較乏氧前明顯升高，而MDR1無明顯改