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1、微擬球藻(Nannochloropsis salina)是單細(xì)胞藻類(lèi),由于它富含各種蛋白、多不飽和脂肪酸及色素,被認(rèn)為是高附加值生物。并且培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單、不消耗淡水資源、易于規(guī)模化養(yǎng)殖,毫無(wú)疑問(wèn)具有巨大的商業(yè)開(kāi)發(fā)潛力。轉(zhuǎn)錄因子(transcription factors,TFs)是一種蛋白質(zhì)分子,能夠識(shí)別基因啟動(dòng)子區(qū)的順式作用原件,并且能夠與這些順式作用原件特異性的結(jié)合,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)下游基因轉(zhuǎn)錄的激活或者抑制。
本研究從實(shí)驗(yàn)室保存
2、的微擬球藻 NgAUREO1的基因序列,重新構(gòu)造釀酒酵母表達(dá)載體pAUR101-AUREO,并成功導(dǎo)入釀酒細(xì)胞中,通過(guò)同源重組結(jié)合到釀酒酵母染色體上。PCR擴(kuò)增、熒光定量檢測(cè),結(jié)果NgAUREO1基因在DNA、RNA水平上表達(dá)。根據(jù)AUREO識(shí)別并結(jié)合DNA核心序列(TGACGT)的特點(diǎn),篩選4個(gè)與細(xì)胞生長(zhǎng)有關(guān)的基因(ATP1、GUA1、PBS2、BNA3)。利用熒光定量 PCR技術(shù)分析各個(gè)基因的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)有2個(gè)基因發(fā)生了顯著變化,
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