耐鹽石油降解菌的分離鑒定及其降解特性研究.pdf

1、從江蘇某油田附近受石油污染土壤中分離出2株以柴油為唯一碳源的耐鹽石油降解菌株LS1和LS4。通過對菌株的生理生長特性、菌體的形態(tài)觀察及16S rDNA基因序列分析鑒定LS1和LS4分別為假單胞菌菌屬（Pseudomonas）和金黃桿菌菌屬（Chryseobacterium），兩株菌都為革蘭氏陰性菌。研究了不同環(huán)境條件對菌株的生長特性和柴油降解效果的影響。結(jié)果表明，菌株LS1可耐受的最高鹽度（NaCl）和柴油濃度分別為6％～8%和1200

2、0 mg·L-1，菌株LS1生長的適宜pH和溫度條件分別為6.0～8.0和24～32℃。外加20～300mg/L的碳源葡萄糖、蔗糖和乳糖均能促進(jìn)菌株生長，大大縮短停滯期。在鹽度為6%、pH7.0、溫度為32℃、投加量為10%的條件下，歷經(jīng)6d，菌株LS1對初始濃度為3000 mg·L-1的柴油的降解率可達(dá)78.3%，菌株LS4可耐受的最高鹽度（NaCl）和柴油濃度分別為6%～8%和11000 mg·L-1，菌株生長的適宜pH和溫度條件分

3、別為7.0～9.0和32～36℃。在鹽度為6%、pH7.0、溫度為32℃、投菌量為8%的條件下，歷經(jīng)6d，菌株LS4對初始濃度為2000 mg·L-1的柴油的降解率可達(dá)61.4%。加入適量葡萄糖和蔗糖，可使LS1對柴油的降解率分別提高至90.5%和92.1%左右，使LS4對柴油的降解率分別提高至78.5%和81.1%左右。重金屬離子對菌株LS1和LS4的生長均有較強(qiáng)的抑制作用。其中，Hg2+的抑制作用最強(qiáng)，Mn2+的抑制作用最小。

4、>　　對菌株的烷烴羥化酶部分基因克隆結(jié)果表明，菌株LS1和LS4基因組中均存在烷烴羥化酶基因片段，基因長度分別708bp和642bp，LS1的烷烴羥化酶部分基因與瓊氏不動桿菌菌株（Acinetobacter junii）的部分氨基酸序列同源性達(dá)到99%，菌株LS4的烷烴羥化酶部分基因與溶血不動桿菌（Acinetobacter haemolyticus）菌株相似性較高，最高相似性達(dá)到98%。表明了不同菌株烷烴羥化酶基因存在有較近的親緣關(guān)系