光響應(yīng)性生物可降解聚合物膠束納米載體用于腫瘤高效治療.pdf

1、本論文主要設(shè)計(jì)制備了基于香豆素的兩種光響應(yīng)性的生物可降解聚合物膠束用于抗癌藥物阿霉素的包裹和細(xì)胞內(nèi)的光控釋放，以實(shí)現(xiàn)高效腫瘤治療。論文第二章報(bào)道了基于透明質(zhì)酸-g-（7-N,N-二乙基氨基-4-羥甲基香豆素）（HA-g-CM）兩親性聚合物的光響應(yīng)性聚合物膠束，其可靶向到乳腺癌MCF-7細(xì)胞，并通過(guò)光控引起癌細(xì)胞內(nèi)DOX的釋放。我們合成了兩種側(cè)鏈接枝不同香豆素量的透明質(zhì)酸HA-g-CM4和HA-g-CM9，二者均可在水中自組裝形成穩(wěn)定的、

2、以HA為殼、香豆素為核的靶向光響應(yīng)性聚合物膠束，動(dòng)態(tài)激光光散射測(cè)定其粒徑為147.2和164.5nm（粒徑分布在0.17左右），臨界膠束濃度為9.1和15.8mg/L。HA-g-CM4和HA-g-CM9膠束能物理包裹DOX，熒光光譜法測(cè)定DOX的包封率分別為71.5%和83.3%。該膠束在儲(chǔ)存條件下穩(wěn)定，但在紫外（UV，110mW/cm2）或近紅外（NIR，785nm，2W/cm2）光照射下，組成膠束疏水內(nèi)核的香豆素和親水的透明質(zhì)酸相連

3、接的氨酯鍵發(fā)生斷裂，香豆素釋放出來(lái)，造成膠束的粒徑顯著變大，粒徑分布變寬。體外釋放實(shí)驗(yàn)體現(xiàn)出DOX和香豆素的釋放具有明顯的光響應(yīng)性：在紫外光照5min或近紅外光照60min后，DOX在隨后的48h內(nèi)釋放了大約74.9%和51.7%，而沒有任何光照的該膠束在相同條件下僅有16.7%的DOX泄漏。但是，該膠束對(duì)紫外光的響應(yīng)性要比近紅外光的響應(yīng)性更明顯。細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)（MTT試驗(yàn)）表明，載DOX的該膠束在被CD44受體過(guò)表達(dá)的乳腺癌MCF-7細(xì)

4、胞靶向內(nèi)吞后，然后在近紅外光照后，72小時(shí)內(nèi)造成57%的癌細(xì)胞死亡，而沒有經(jīng)過(guò)光照的相同細(xì)胞僅有35%的細(xì)胞死亡，說(shuō)明了DOX釋放和細(xì)胞死亡是近紅外光照激發(fā)的；而對(duì)CD44受體不表達(dá)的U-87MG細(xì)胞、經(jīng)過(guò)相同光照后，或是MCF-7細(xì)胞預(yù)先用自由HA處理過(guò)再光照，僅引起大約25%的癌細(xì)胞死亡，驗(yàn)證了該膠束的特異靶向性。同時(shí)，MTT試驗(yàn)表明空聚合物膠束HA-g-CM、聚合物HA-g-lys12、以及光照產(chǎn)生的降解產(chǎn)物HA-g-lys12+

5、CM在測(cè)試濃度范圍內(nèi)（<1.0mg/mL）對(duì)MCF-7和U-87MG細(xì)胞基本無(wú)毒。熒光顯微鏡觀察結(jié)果表明，載DOX的HA-g-CM膠束能通過(guò)受體-配體的相互作用介導(dǎo)的內(nèi)吞而靶向性地進(jìn)入MCF-7癌細(xì)胞內(nèi)，并在近紅外光照下高效把DOX釋放出來(lái)。
　　在論文第三章中，我們?cè)O(shè)計(jì)了基于生物可降解兩親聚合物聚乙二醇-聚己內(nèi)酯（PEG-PCL）、PEG和PCL兩段之間以光響應(yīng)性的4-羥甲基-7-氨基-乙氧基香豆素連接的PEG-CM-PCL的、

6、近紅外光響應(yīng)殼可摒棄的聚合物膠束，用于抗癌藥物的裝載、光（紫外或近紅外）觸發(fā)釋放和有效內(nèi)涵體逃逸。我們?cè)O(shè)計(jì)合成了帶有雙官能團(tuán)的4-羥甲基-7-羥基香豆素，然后通過(guò)其酚羥基與溴發(fā)生取代反應(yīng)得到帶有羥基和氨基的、可做連接點(diǎn)的雙官能團(tuán)4-羥甲基-7-氨基-乙氧基香豆素（CM）。同時(shí)，我們合成了對(duì)硝基苯甲酸酯活化的功能性聚乙二醇（PEG-4NC），并開環(huán)聚合得到聚己內(nèi)酯和氨基功能化的PCL-NH2。下一步計(jì)劃將該雙官能化的CM與PEG-4NC加