腫瘤靶向和環(huán)境響應(yīng)性多臂聚合物膠束的研究.pdf

1、化療是目前治療腫瘤的重要方法之一，可以在一定程度抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，但治療時(shí)給患者帶來了很大的毒副作用。眾多研究者為提高藥物的生物利用度和降低藥物的毒副作用進(jìn)行了廣泛的研究，其中聚合物膠束是一種有效方法。在納米尺寸的膠束上接枝的靶向基團(tuán)使抗癌藥物能被運(yùn)輸?shù)讲∽儾课?，從而提高病變部位的有效藥物濃度，減少用藥量，降低藥物對(duì)正常組織的毒性。納米膠束在體內(nèi)有長(zhǎng)循環(huán)、隱形等特點(diǎn)，有利于增加藥物的靶向性。本文旨在合成接枝葉酸基團(tuán)、氧化還原敏感鍵等的多

2、臂聚合物，構(gòu)建載抗腫瘤藥物與基因藥物的聚合物膠束，并對(duì)其特性及生物學(xué)性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　首先，本論文成功地合成了含葉酸(FA)靶向基團(tuán)、氧化還原敏感鍵的載藥多臂聚合物。FA共價(jià)接枝于兩親性聚合物親水端，可改變多臂聚合物上的接枝數(shù)量;抗腫瘤藥物羥基喜樹堿(CPT)通過二硫鍵接枝于聚合物的疏水端，可在谷胱甘肽(GSH)的作用下敏感地釋放藥物。采用溶劑揮發(fā)法制備制備四種載藥聚合物膠束，平均粒徑在100 nm左右，臨界膠束濃度(CMC)在

3、0.8-2.5μg/ml之間。在GSH作用下膠束的粒徑迅速增加達(dá)到數(shù)百納米，同時(shí)二硫鍵斷裂引起CPT的快速釋放。相比直鏈聚合物膠束，多臂聚合物膠束具有更低的CMC和更高的氧化還原敏感性。不同數(shù)量的親水鏈段接枝靶向基團(tuán)FA，導(dǎo)致膠束表面FA密度不同，影響到膠束的細(xì)胞吞噬量。結(jié)果表明，在多臂兩親嵌段聚合物中有兩臂接枝FA、另外兩臂接枝CPT時(shí)，聚合物膠束的IC50(1.49μg/ml)最低，細(xì)胞凋亡比例最高達(dá)到84.8％。以上結(jié)果表明多臂聚

4、合物的組成和臂的結(jié)構(gòu)的改變能顯著影響膠束的性能，通過改變多臂兩親嵌段聚合物中靶向基團(tuán)和抗腫瘤藥物的接枝數(shù)量，可達(dá)到最佳的抗腫瘤效果。
　　其次，本論文成功地合成了含靶向基團(tuán)FA、酸度敏感烏頭酸鍵和氧化還原敏感二硫鍵的多臂聚乙二醇-聚天冬氨酸-2-乙基三氨-喜樹堿載藥聚合物，CPT的含量達(dá)到9.3％。采用超聲法成功制備了聚合物膠束，臨界結(jié)束濃度分別是0.89μg/ml，平均粒徑為126 nm，Zeta電位為+11.7 mV。該膠束在

5、N/P低于10時(shí)能完全結(jié)合腫瘤壞死因子(TNF)質(zhì)粒，獲得同時(shí)攜載抗腫瘤藥物和質(zhì)粒DNA的聚合物膠束，在N/P為15時(shí)，粒徑最?。?15nm）。肝素置換和脫氧核糖核苷酸酶降解實(shí)驗(yàn)表明，聚合物膠束對(duì)TNF質(zhì)粒有較強(qiáng)的結(jié)合能力和保護(hù)作用。載藥膠束在10mM的GSH和pH5.0的環(huán)境下，粒徑增大且穩(wěn)定性降低，并且快速釋放出CPT及TNF質(zhì)粒，實(shí)現(xiàn)了抗腫瘤藥物和基因在細(xì)胞吞噬過程中控制釋放的目的。流式細(xì)胞儀結(jié)果表明，該膠束成功地介導(dǎo)CPT和TN