昆侖雪菊中結(jié)合型降壓活性成分的分離與鑒定.pdf

1、昆侖雪菊在降血壓方面具有顯著功效而被廣泛應(yīng)用于民間，然而因技術(shù)手段限制無(wú)法充分開發(fā)雪菊的價(jià)值，全面研究雪菊的功效具有重要意義。結(jié)合型昆侖雪菊活性成分因與細(xì)胞壁以共價(jià)鍵結(jié)合，難以直接用溶劑萃取出來(lái)。本研究采用堿降解法使結(jié)合型化合物釋放出來(lái)并通過(guò)響應(yīng)面分析法優(yōu)化降解條件，在此基礎(chǔ)上利用不同溶劑對(duì)降解產(chǎn)物進(jìn)行提取，并篩選出最佳的溶劑得到粗提物，利用常壓硅膠柱層析和SepdexLH-20凝膠柱層析對(duì)粗提物中的化合物進(jìn)行分離純化得到單體化合物，采

2、用DPPH及ABTS法對(duì)單體化合物進(jìn)行抗氧化活性評(píng)價(jià)，并通過(guò)體外ACE酶抑制試驗(yàn)對(duì)單體化合物進(jìn)行評(píng)價(jià)，得到以下結(jié)論。
　　(1)最佳的堿降解單因素條件為:時(shí)間為2h，溫度為50℃，NaOH濃度為2mol·L-1，最佳提取溶劑為正丁醇，在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)了響應(yīng)面試驗(yàn)，得到最優(yōu)工藝參數(shù)為降解溫度56℃，堿液濃度1.65mol·L-1，降解時(shí)間2h，該工藝條件可使總黃酮得率達(dá)23.0908mg·g-1，驗(yàn)證結(jié)果為23.067mg·g-1。所

3、選3因素的二次多項(xiàng)回歸方程為:Y=-27.6734+1.5389A+6.9080B+1.3468C-0.0663AB+0.0435AC+0.0525BC-0.0134A2-0.9845B2-0.9570C2。
　　(2)從粗提物中分離得到8個(gè)單體化合物，采用核磁共振技術(shù)(NMR)、電噴霧質(zhì)譜技術(shù)(ESIMS)等鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)，8個(gè)單體化合物的結(jié)構(gòu)分別為:4，6-二羥基-2-[6-羥基-1，5-二甲基4-己烯基]-5-苯甲基-β-D

4、-吡喃葡萄糖苷、金雞菊查爾酮4'-O-β-D-吡喃葡萄糖、香草醛、3'，4'，7，8-四羥基二氫黃酮、3'，4'，7，8-四羥基黃酮、2-苯乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷、芳樟醇-3，6-氧合-β-D-吡喃葡萄糖苷、對(duì)香豆酸甲酯，其中4，6-二羥基-2-[6-羥基-1，5-二甲基-4-己烯基-5-苯甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷為首次分離得到。
　　(3)活性測(cè)定結(jié)果表明化合物1、2、4、5具有較強(qiáng)的抗氧化能力，化合物1、2、4、5對(duì)DP

5、PH的半數(shù)抑制率IC50分別為92.21μmol·L-1、17.29μmol·L-1、70.09μmol·L-1和50.07μmol·L-1，對(duì)ABTS自由基半數(shù)抑制率IC50分別為43.06μmol·L-1、22.86μmol·L-1、33.40μmol·L-1和32.52μmol·L-1。
　　(4) ACE酶抑制活性表明化合物2、4、5具有較強(qiáng)的ACE酶抑制活性?；衔?、4、5對(duì)ACE酶的半數(shù)抑制率IC50分別為175.1