茶油酶促酯交換制備類可可脂的研究.pdf

1、本論文系統(tǒng)研究了豬胰脂酶的固定方法和酶促酯交換制備類可可脂的工藝條件優(yōu)化.首先,對(duì)活性炭,大孔吸附樹脂,硅膠,硅藻土,大孔玻璃珠,202紅色擔(dān)體等固定載體進(jìn)行篩選.以篩選出的大孔吸附樹脂為載體研究了豬胰脂酶吸附固定的方法及其固定條件的優(yōu)化.著重闡述了加酶量,含水量,緩沖液pH,吸附時(shí)間等因素對(duì)固定效率及固定化酶比活的影響.最佳固定條件為酶加量300mg/g;吸附時(shí)間4h;吸附pH7.5;水分含量20﹪.同時(shí)還研究了固定化酶的熱穩(wěn)定性,操

2、作穩(wěn)定性以及米氏常數(shù)等性質(zhì).所得的固定化酶與游離酶相比,比酯交換能力提高了6.9倍;水解最適溫度提高了10℃;50℃保溫12h后相對(duì)活力由30.98﹪上升到83.14﹪;連續(xù)操作5批次后的相對(duì)活力則由32.20﹪上升到83.50﹪.固定化酶不論在酶活還是在穩(wěn)定性方面都有較大提高.隨后對(duì)以茶油,硬脂酸甲酯,棕櫚酸甲酯為底物,在自行制備的固定化酶的催化作用下對(duì)酯交換反應(yīng)制備類可可脂進(jìn)行了系統(tǒng)研究.先經(jīng)過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)溫度,加酶量,

3、體系含水,底物比,有機(jī)溶劑,?；w等因素對(duì)酯交換反應(yīng)的影響進(jìn)行顯著性檢驗(yàn),隨后對(duì)影響顯著的5種因素作單因素實(shí)驗(yàn)以詳細(xì)研究它們對(duì)酶促酯交換反應(yīng)的影響情況.通過以上實(shí)驗(yàn),找到了制備類可可脂的最優(yōu)條件:體系含水量10mg/g;反應(yīng)溫度35℃;底物比為茶油:硬脂酸甲酯:棕櫚酸甲酯=1:8:8(mol/mol);酶加量15wt﹪;反應(yīng)時(shí)間60小時(shí);有機(jī)溶劑,正己烷;?；w,硬脂酸甲酯,棕櫚酸甲酯.所得產(chǎn)物甘三酯在sn-2位上主要為油酸(77.