山楂原花青素色譜行為及其硫解轉(zhuǎn)換系數(shù)研究.pdf

1、山楂（Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.）是我國傳統(tǒng)的藥食兼用品種，多酚尤其是原花青素類成分是山楂果實(shí)的主要活性成分。本研究以山楂多酚為樣品，采用HPLC法考察了柱溫和流動(dòng)相變化對(duì)保留時(shí)間的影響。采用山楂原花青素提取物為樣品，優(yōu)化了硫解反應(yīng)條件;采用優(yōu)化的反應(yīng)條件考察了不同山楂多酚組分的硫解回收率，計(jì)算出硫解-HPLC法測定山楂原花青素的硫解回收率即硫解轉(zhuǎn)換系數(shù)。主要結(jié)果如下:

2、　　1.對(duì)柱溫和流動(dòng)相變化影響山楂多酚保留規(guī)律進(jìn)行非線性擬合。結(jié)果表明，甲醇水或乙腈水溶液條件下，山楂多酚組分保留的容量因子對(duì)數(shù)與柱溫變化之間關(guān)系規(guī)律都是呈線性的。而山楂多酚組分保留的容量因子對(duì)數(shù)與流動(dòng)相變化之間關(guān)系規(guī)律符合二次多項(xiàng)式，與頂替吸附模型方程相比，相關(guān)系數(shù)更好，達(dá)0.99以上。在18％乙腈條件下，用擬合的方程對(duì)山楂多酚的保留時(shí)間進(jìn)行預(yù)測，二次多項(xiàng)式方程預(yù)測的保留時(shí)間與實(shí)測值之間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差更小，7％以內(nèi)。
　　2.對(duì)山

3、楂多酚的色譜保留規(guī)律考察，開發(fā)了一種以甲醇-乙腈-水組成的三元流動(dòng)相的梯度色譜方法。色譜條件為:色譜柱:Hypersil BDS C18(250mm×4.6mm i d，5μm);溫度:35℃;流動(dòng)相A:500μL/L甲酸水溶液，B:甲醇/乙腈=5∶4含500μL/L的甲酸;梯度程序:(min/B％)0/15，11/15，15/17，16/18，19/20，24/29,31/50，33/80，38/80，40/15，50/15;流速:0

4、.8 mL/min;光電二極管陣列檢測器，波長:280 nm;進(jìn)樣量:5μL;峰面積外標(biāo)法定量。
　　3.對(duì)山楂原花青素的硫解衍生反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，并對(duì)各組分的硫解回收率進(jìn)行了測定。結(jié)果表明，以冰醋酸∶1M鹽酸=50∶1(v/v)為原花青素裂解劑，芐硫醇濃度為5％，溫度90℃，經(jīng)60min反應(yīng)，可以保證山楂中的原花青素能夠被徹底降解。原花青素D6、C3、B2、EC、C1、D1、E1、C2、D2、B5、EC-S硫解質(zhì)量回收率分別為

5、:69.7％、72.3％、81.0％、85.8％、46.5％、61.4％、65.7％、74.3％、63.7％、90.3％、89.7％。
　　4.以主要各組分占山楂原花青素總量的權(quán)重和硫解回收率，計(jì)算了硫解轉(zhuǎn)換系數(shù)，并據(jù)此對(duì)實(shí)際測定樣品的結(jié)果進(jìn)行了校正。結(jié)果表明，山楂原花青素硫解轉(zhuǎn)換系數(shù)為75.1％。經(jīng)校正后，山楂及其釀制的新酒PC含量分別為4378μg/g和1457μg/g，平均聚合度為2.0和1.7。
　　5.對(duì)硫解反應(yīng)結(jié)