沙棗果肉原花青素的分離、鑒定與抗氧化研究.pdf

1、原花青素是廣泛存在于植物中的一大類多酚化合物，是近年來(lái)不斷研究開發(fā)的一種極強(qiáng)的體內(nèi)活性功能因子。許多研究表明，原花青素具有較強(qiáng)的抗氧化能力、清除自由基能力和較好的藥理活性，目前國(guó)外正將其廣泛應(yīng)用于保健品、藥品和化妝品等領(lǐng)域。在原花青素研究領(lǐng)域，葡萄一直是人們所密切關(guān)注的研究對(duì)象。1997年，由葡萄籽原花青素提取物所制成的OPC保健品，商品名為葡樂(lè)安，已在美國(guó)市場(chǎng)暢銷，并受到極大歡迎。盡管原花青素保健食品在國(guó)外蓬勃發(fā)展，但在我國(guó)作為進(jìn)口保

2、健食品，價(jià)格仍十分昂貴，所以利用我國(guó)資源的優(yōu)勢(shì)，從更多的植物中提取天然抗氧化劑OPC是迫在眉睫的任務(wù)。 沙棗果肉營(yíng)養(yǎng)十分豐富，其含糖量高、氨基酸種類齊全、礦物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)豐富，并含有一定量的淀粉、果膠和有機(jī)酸，同時(shí)含有微量的黃酮類物質(zhì)、尼克酸、硫胺素、核黃素和胡蘿卜素等，對(duì)滿足人體的需要都是非常重要的，但目前對(duì)沙棗原花青素的研究卻鮮有報(bào)道。華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院謝筆鈞教授實(shí)驗(yàn)室曾有人對(duì)沙棗原花青素作過(guò)一些研究，該課題旨在進(jìn)一步對(duì)沙棗

3、果肉原花青素(Elaeagnusangustifolia.LJujubessarcocarpprocyanidins，簡(jiǎn)稱ESPC)的提取、分離、純化、鑒定、抗氧化性能及清除·OH效果作出研究，以期發(fā)現(xiàn)更多的原花青素天然植物資源，并希望對(duì)沙棗的進(jìn)一步開發(fā)利用起到一定的推動(dòng)作用。 該研究的主要研究成果如下: (1)首先測(cè)定了沙棗果肉中蛋白質(zhì)、脂肪等主要營(yíng)養(yǎng)成分的含量，并采用BuOH-HCl法和Folinfen-Ciocal

4、team法對(duì)ESPC含量進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果表明甘肅武威小果型沙棗果肉原花青素含量較高，很有研究意義，所以確定為實(shí)驗(yàn)材料。 (2)對(duì)ESPC的提取工藝進(jìn)行了初步探討，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)，在中心組合實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，運(yùn)用響應(yīng)面分析法得出了提取ESPC的最佳工藝條件：提取溫度76.30℃、提取時(shí)間85.93min、乙醇濃度72.18％、提取液pH5、料液比1：9、提取3次。在此條件下提取率達(dá)90％以上。 (3)在最佳提取工藝條件下，采用固

5、相萃取的方法對(duì)沙棗果肉提取物中原花青素進(jìn)行了純化，產(chǎn)物純度為89.91％，原花青素的得率為4.23％；并采用乙酸乙酯萃取法和石油醚沉淀法進(jìn)一步對(duì)固相萃取后的ESPC粗提物進(jìn)行了精制。結(jié)果表明，乙酸乙酯萃取和石油醚沉淀的分離效果明顯，并由此得到了四種不同類型的ESPC提取物，即乙酸乙酯萃取物、乙酸乙酯萃取水相提取物、石油醚沉淀物和石油醚沉淀水相提取物。 (4)采用IR、HPLC等手段對(duì)ESPC粗提物、乙酸乙酯萃取物、乙酸乙酯萃取水

6、相提取物、石油醚沉淀物、石油醚沉淀水相提取物五種不同類型的ESPC提取物的分離鑒定進(jìn)行了深入研究。結(jié)果表明，石油醚沉淀和乙酸乙酯萃取的分離效果較好，石油醚沉淀物與乙酸乙酯萃取物中富含原花青素二聚體和三聚體，兩者相應(yīng)的水相提取物中則大部分為原花青素高聚物和其他一些雜質(zhì)。 (5)ESPC抗氧化性能的測(cè)定：共設(shè)計(jì)了如下三組實(shí)驗(yàn)，即①不同ESPC添加量對(duì)豬油抗氧化性的影響；②ESPC與其他抗氧化劑(Vc、檸檬酸、酒石酸)抗氧化性的比較；

7、③ESPC與其他抗氧化劑(Vc、檸檬酸、酒石酸)的協(xié)同增效作用。通過(guò)以上三組實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，首先ESPC對(duì)豬油的抗氧化能力有劑量效應(yīng)關(guān)系，即隨著原花青素添加劑量的增大，其抗氧化效果也增強(qiáng)；其次ESPC對(duì)豬油的抗氧化能力優(yōu)于Vc、檸檬酸和酒石酸，對(duì)比測(cè)定的結(jié)果為ESPC＞Vc＞檸檬酸＞酒石酸；另外發(fā)現(xiàn)ESPC的抗氧化性能與抗壞血酸、檸檬酸和酒石酸具有協(xié)同增效作用，增效作用的強(qiáng)弱順序?yàn)閂c＞檸檬酸＞酒石酸。以上分析表明ESPC具有很強(qiáng)的抗氧化能力

8、，并且和其他抗氧化劑混合使用時(shí)抗氧化作用增強(qiáng)。 (6)最后對(duì)ESPC粗提物(A1)、乙酸乙酯萃取物(A2)、乙酸乙酯萃取水相提取物(A3)、石油醚沉淀物(A4)、石油醚沉淀水相提取物(A5)五種不同類型的ESPC提取物的清除·OH效果與茶多酚(TPE)、葡萄籽原花青素(GSPC)進(jìn)行了對(duì)比測(cè)定，對(duì)比測(cè)定的結(jié)果為：GSPC＞A4＞A2＞A1＞A3＞A5＞TPE，五種不同類型的ESPC提取物的·OH清除率均在88％以上，均大于TPE