生物被膜引起食品生物危害的研究——食源性病原菌生物被膜在不銹鋼表面的形成過程及其對殺菌劑的敏感性.pdf

1、該實驗研究食源性病原菌(金黃色葡萄球菌,沙門氏菌)生物被膜在不銹鋼表面形成過程及其對常見消毒劑(次氯酸鈉,二氧化氯)的敏感性,為在食品加工過程中對加工設(shè)備的不銹鋼表面清洗消毒提供了試驗數(shù)據(jù),并為食品加工中對其他表面的清洗消毒提供參考.通過建立食源性病原菌(金黃色葡萄球菌和沙門氏菌)生物被膜模型,測定它們在不銹鋼表面形成生物被膜的生長曲線,同時結(jié)合金黃色葡萄球菌和沙門氏菌的生長曲線,分析食源性病原菌生物被膜在不銹鋼表面的形成過程;采用掃描

2、電鏡(scanning electron microscope,SEM)確認(rèn)生物被膜形態(tài)并采用計算機(jī)圖形處理系統(tǒng)進(jìn)行圖形分析;采用平板擦拭法(plating ofswabbing)測定生物被膜中存活細(xì)菌數(shù);采用試管稀釋法測定常見殺菌劑對生物被膜及其菌懸液的最低清除濃度.金黃色葡萄球菌和沙門氏菌分別在大豆胰酶肉湯(Trypease soy broth,TSB)中與不銹鋼片共同培養(yǎng)7d后可形成穩(wěn)定的生物被膜,細(xì)菌密度約達(dá)到10<'6>cfu

3、/cm<'2>.用掃描電鏡可見金黃色葡萄球菌生物被膜細(xì)菌呈球狀,沙門氏菌生物被膜細(xì)菌呈桿狀,周圍分布凹凸不平的塊狀物,菌體周圍和相互間以粘稠的粘液絲相連,借助于粘液樣物使細(xì)菌之間相互連接形成生物被膜.有效氯濃度、TSB培養(yǎng)基濃度、作用時間均能影響殺菌劑的殺菌效果.當(dāng)不含TSB培養(yǎng)基時,消毒劑(次氯酸鈉和二氧化氯)有效氯濃度50~100mg/l作用時間超過20min,可使10<'6> cfu/ml的菌懸液殺菌率達(dá)到100﹪,次氯酸鈉和二氧

4、化氯有效氯濃度100~150 mg/l作用時間超過20min,可使細(xì)菌密度為10<'6>cfu/cm<'2>的生物被膜殺菌率達(dá)到100﹪.當(dāng)在3.0﹪(w/v)TSB中,次氯酸鈉和二氧化氯有效氯濃度大于150mg/l作用30min后,可使10<'6>cfu/ml的菌懸液殺菌率達(dá)到100﹪,而在有效氯濃度超過400mg/l作用30min后,才使細(xì)菌密度為10<'6>cfu/cm<'2>的生物被膜殺菌率達(dá)到100﹪.實驗中,二氧化氯對菌懸液