甾體激素類藥物分析方法應(yīng)用研究.pdf

1、甾體激素類藥物是指分子結(jié)構(gòu)中含有甾體結(jié)構(gòu)的激素類藥物，由于具有多種生理活性，甾體激素藥物臨床使用日益廣泛，已成為藥物的一個(gè)重要分支。藥品質(zhì)量直接關(guān)系人們的身體健康甚至生命安全，必須對(duì)藥品質(zhì)量進(jìn)行全面監(jiān)控，藥物分析學(xué)應(yīng)運(yùn)而生。甾體藥物分析研究包括三個(gè)方面:尋找準(zhǔn)確可靠的方法對(duì)原料藥及制劑含量進(jìn)行測(cè)定;尋求簡便、快速地從組成復(fù)雜的生物樣品中靈敏、可靠地檢測(cè)痕量藥物分析方法;研究甾體藥物與蛋白質(zhì)、氨基酸等作用。
　　本論文研究目的是:以

2、光譜法或色譜法為檢測(cè)手段，利用分子有序聚集體的光譜增敏作用和選擇性萃取作用，探尋甾體激素類藥物更靈敏、更簡單的分離分析方法，并對(duì)增敏和萃取機(jī)理進(jìn)行初步探討，其主要內(nèi)容包括:
　　1、β-環(huán)糊精增敏熒光法測(cè)定醋酸阿比特龍酯和阿比特龍
　　提出分子有序聚集體β-環(huán)糊精(β-CD)增敏熒光法測(cè)定雄性激素醋酸阿比特龍酯及其新陳代謝產(chǎn)物阿比特龍含量的新方法，作用機(jī)理研究表明醋酸阿比特龍酯或阿比特龍可與β-CD形成包合物從而使其熒光強(qiáng)度

3、得到增強(qiáng)。對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了優(yōu)化，在優(yōu)化條件下醋酸阿比特龍酯或阿比特龍濃度在0.20-6.0μg/mL范圍內(nèi)與熒光強(qiáng)度呈良好線性關(guān)系，檢測(cè)限分別為6.8 ng/mL（醋酸阿比特龍酯）(r=0.997)和6.6 ng/mL（阿比特龍）(r=0.996)。一般共存物質(zhì)或藥物輔料對(duì)測(cè)定沒有干擾。使用本法測(cè)定了藥片中的醋酸阿比特龍酯和人血清/尿樣中阿比特龍含量，結(jié)果令人滿意。
　　2、表面活性劑/離子液體雙水相萃取熒光法分離分析藥物及生物樣

4、品中度他雄胺
　　基于雄性激素度他雄胺能夠被分子有序聚集體[表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)/離子液體溴化1-己基-3-甲基咪唑(IL)]雙水相體系萃取且萃取后熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，提出了測(cè)定藥物及生物樣品中度他雄胺含量的熒光新方法。雙水相形成是由于形成新的分子有序聚集體SDS/IL。對(duì)影響萃取和測(cè)定條件進(jìn)行了優(yōu)化，在優(yōu)化條件下，萃取率在95.0％以上，富集倍數(shù)為7.5。線性范圍為0.016-0.64μg/mL，r=0.999(n=

5、8)，檢出限為2.2 ng/mL。將所提方法用于度他雄胺軟膠囊和人血清中度他雄胺含量測(cè)定，回收率在96.7％-108.0％，樣品測(cè)定結(jié)果與HPLC法一致。實(shí)驗(yàn)中同時(shí)對(duì)雙水相萃取機(jī)理進(jìn)行探討。
　　3、無分散劑超聲輔助離子液體分散液液微萃取HPLC分離分析醋酸烏利司他
　　提出一種基于超聲輔助離子液體分散液液微萃取HPLC測(cè)定鼠血清及藥片中孕激素醋酸烏利司他含量的新方法。在超聲幫助下，無需分散劑疏水性離子液體1-辛基-3-甲基

6、咪唑六氟磷酸鹽([C8mimPF6])即可形成細(xì)小的分子有序聚集體液滴分散在樣品水溶液中從而可定量萃取分析物醋酸烏利司他。對(duì)實(shí)驗(yàn)條件如萃取劑的種類和用量、萃取時(shí)間、萃取溫度、溶液pH、離心時(shí)間等進(jìn)行優(yōu)化。在優(yōu)化條件下，工作曲線的線性范圍為0.03-6.0μg/mL，檢測(cè)限分別為6.8 ng/mL（藥片）和9.3 ng/mL（血清），加標(biāo)回收率為103.5％-109.7％，富集倍數(shù)為25。用本方法對(duì)醋酸烏利司他藥片和鼠血清樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)

7、果令人滿意。萃取機(jī)理表明疏水作用力是萃取的主要驅(qū)動(dòng)力。
　　4、基于微量注射器的微型離子液體分散液液微萃取UV法分離分析鼠血清及藥物中達(dá)那唑
　　首次提出基于1 mL微量注射器的微型化分散液液微萃取分離分析藥物及鼠血清中雄性激素達(dá)那唑含量的新方法。通過注射萃取劑1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽([C8mimPF6])于樣品溶液中，以每秒一個(gè)循環(huán)的速度反復(fù)推拉幾次，萃取劑形成分子有序聚集體細(xì)小霧滴分散在樣品溶液中，從而快速萃取

8、被分析物。方法優(yōu)點(diǎn)為萃取中既不需使用任何分散劑，也無需借助超聲或高溫，萃取后以微量紫外分光光度法(UV)測(cè)定達(dá)那唑濃度。實(shí)驗(yàn)中對(duì)萃取條件如萃取劑種類及用量、溶液pH、推拉次數(shù)及鹽的影響進(jìn)行優(yōu)化。在優(yōu)化條件下，工作曲線的線性范圍為0.62-25.0μg/mL，檢測(cè)限分別為0.055μg/mL（藥片）和0.054μg/mL（血清），加標(biāo)回收率為90.5％-103.4％。用本方法對(duì)達(dá)那唑膠囊和鼠血清樣品進(jìn)行測(cè)定，同時(shí)與HPLC進(jìn)行比較，結(jié)果令

9、人滿意。
　　5、超聲乳化-懸浮溶劑固化微萃取分離分析藥物及生物體液中愛普列特
　　提出基于超聲乳化-懸浮有機(jī)溶劑固化微萃取-微量紫外分光光度法測(cè)定藥片及人血清中雄性激素愛普列特(EP)含量的新方法。在超聲幫助下，分子有序聚集體1-十一醇在待測(cè)樣品水溶液中產(chǎn)生乳化現(xiàn)象，從而可定量萃取水相中的愛普列特，經(jīng)離心后冷卻1-十一醇液滴發(fā)生凝固而與水相分離，萃取率在90.0％以上，富集倍數(shù)為20。研究中還發(fā)現(xiàn)愛普列特對(duì)L-色氨酸自身熒