朗德鵝血資源價(jià)值探析與產(chǎn)品研發(fā).pdf

1、鵝血營(yíng)養(yǎng)豐富,又是民間廣為流傳的抗癌防癌食品,卻在實(shí)際生產(chǎn)中苦于無(wú)法有效轉(zhuǎn)化其價(jià)值而白白被浪費(fèi)。本課題正是針對(duì)解決這一生產(chǎn)實(shí)際中資源浪費(fèi)的現(xiàn)象。通過(guò)對(duì)朗德鵝血資源成分和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值分析,全面闡述其具有的優(yōu)勢(shì)資源,進(jìn)一步對(duì)其血漿蛋白進(jìn)行解析,對(duì)鵝血液中具有的特異性免疫球蛋白-重量缺失型免疫球膽白IgY(△Fc)進(jìn)行分離純化鑒定,并對(duì)其重鏈的氨基酸組成進(jìn)行分析。根據(jù)鵝血營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn),結(jié)合廣西地方特色,開(kāi)發(fā)出朗德鵝血液的食品--酒浸蒸煮鵝血香腸。對(duì)

2、IgY(△Fc)進(jìn)行鹽析法分離提取,并對(duì)其工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化,為大量制備高附加值蛋白產(chǎn)品進(jìn)行技術(shù)儲(chǔ)備。具體主要工作如下:
　　朗德鵝資源價(jià)值初探,擇選優(yōu)勢(shì)組分:通過(guò)對(duì)朗德鵝在飼喂前后的血液成分進(jìn)行理化、生化等指標(biāo)的對(duì)比,尋找出特色的優(yōu)勢(shì)組分。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,填喂鵝血較未填喂鵝血水分含量降低,粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、灰分含量含量增長(zhǎng)顯著。且血漿中總蛋白、球蛋白、高密度脂蛋白等含量比例均有增長(zhǎng),但白蛋白、低密度脂蛋白含量比例同比下降;礦質(zhì)元素的

3、總量增加,且常量元素磷和鐵含量增長(zhǎng)最為顯著;微量元素中多種元素含量增加,而銅、錳元素的含量下降;填喂鵝血維生素A含量、超氧化物歧化酶(SOD)的比活和血紅素含量較未填喂鵝血均有所提升。
　　血漿蛋白多態(tài)分析,IgY(△Fc)分離純化鑒定:SDS-PAGE電泳解析填喂和未填喂條件血漿蛋白結(jié)果顯示,填喂后的朗德鵝血漿中具有11條特征譜帶,其中IgY(?Fc)為第9特征譜帶,且其比例高于未填喂朗德鵝血,同時(shí) IgY比例則有所下降。通過(guò)標(biāo)

4、準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算得到 IgY(?Fc)分子量為36.51Kda,填喂后的朗德鵝中 IgY(?Fc)約為1.773mg/mL。氨基酸分析顯示,在必需氨基酸中,蛋氨酸增長(zhǎng)最為顯著。理想蛋白模式計(jì)算SRC顯示,填喂后的郎德鵝血較未填喂的鵝血更具綜合營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。兩種初提取方法下對(duì)IgY(?Fc)粗提比較中,CA-AS沉淀法提取純度更高,AS沉淀法有更高的回收率,應(yīng)根據(jù)技術(shù)要求從中選擇。使用CA-AS沉淀法粗提條件為:pH=5.4,25℃條件下,首先使用

5、辛酸除雜后,加入飽和硫酸銨濃度至30％,離心除雜,將硫酸銨濃度增加至55%,收集沉淀。即為IgY(?Fc)的初提液。使用 AS沉淀法初提條件為:pH=5.4,25℃條件下,加入硫酸銨飽和度至30%,離心除雜后,將硫酸銨飽和度增加至45%左右時(shí),收集沉淀。即為IgY(?Fc)的初提液。DEAE-sepharose CL6B陰離子柱結(jié)合疏水柱洗脫顯示洗脫效果顯著,但此時(shí)IgY(?Fc)疏水作用下,氫鍵斷裂,只剩重鏈最終洗脫。使用質(zhì)譜分析并比

6、對(duì)搜庫(kù),結(jié)果顯示并未有匹配的免疫球蛋白在庫(kù)。IgY(?Fc)重鏈的氨基酸種類(lèi)僅含有4類(lèi)。其中半胱氨酸的含量最為顯著,且IgY(?Fc)重鏈與IgY的抗原結(jié)合區(qū)具有相似的氨基酸組成。
　　廣西特色鵝血酒浸蒸煮香腸的研發(fā):對(duì)開(kāi)發(fā)鵝血酒浸蒸煮香腸質(zhì)構(gòu)、色差和感官特性進(jìn)行研究表明,鵝血添加量對(duì)蒸煮后的香腸的硬度和咀嚼性均有明顯的影響。色差分析發(fā)現(xiàn),隨著鵝血添加量的增加,香腸的L*值降低,a*值升高。感官評(píng)價(jià)指標(biāo)與質(zhì)構(gòu)分析、色差分析結(jié)果的相

7、關(guān)性較好。最優(yōu)配比結(jié)果為鵝血、三花酒添加量占總量為16%和9%時(shí),香腸的感官評(píng)評(píng)分最高,滋味獨(dú)特。
　　特異性蛋白 IgY(?Fc)的初提:使用鹽析法提取 IgY(?Fc)預(yù)測(cè)最優(yōu)工藝為AS飽和度、pH值、溫度分別為AS飽和度、pH值、溫度分別為47.95%、5.19、29.33℃,預(yù)測(cè)純度為27.36%,回收率為52.74%。根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際,調(diào)整工藝參數(shù)為:AS飽和度、pH值、溫度三因素為50%、5.20和30℃的條件下進(jìn)行3次平